距离公元1590年历史上第一台真正意义的显微镜诞生,已过去了整整4个世纪。显微镜技术伴随着光路设计、光源、荧光染料、荧光蛋白、透镜、相机、电子器件、分析软件、计算机等的综合发展,在今天已成为生命科学研究必备的工具。生命活动过程中都会伴随有信息的发生。相较于数字、符号、曲线、图表、声音等形式的信息,图像所提供的视觉直观作用,能够更充分地展现事物的本来面目,有利于人们对生命活动的理解和分析。而流式分析分选技术,则在不到100年的发展过程中,整合了细胞计数、免疫荧光、分光光度计、单克隆抗体技术等涉及多学科、多领域的前沿技术,可以根据所测定的各种细胞性质的不同表现,从细胞群体中将某个细胞亚群分选出来,进一步进行功能形态的或其他的研究,因而在生物学、临床医学、药物学等众多领域中得到广泛应用。2种技术既有不同,如数据呈现的形式不同;又有相同,如都用到了免疫荧光相关技术。它们在各有特色的同时,又相互补充,成为生物学领域中细胞及组织水平结构与功能研究的不可或缺的分析手段。
复合激光显微镜系统,正是基于此而设计、规划并建设的。复合激光显微镜系统隶属于国家蛋白质科学研究(上海)设施,坐落于浦东新区海科路园区C座2楼,占地约600 m2,建设周期3年。
系统包括了转盘式激光共聚焦显微镜、超高分辨率显微镜、双光子显微成像、高通量细胞分析4个功能模块。转盘式激光共聚焦显微镜、随机光学重建超高分辨率显微镜、结构照明超高分辨率显微镜、双光子显微镜、单光子激光共聚焦显微镜、高通量细胞分析系统、荧光激发细胞分选仪、流式细胞仪等共计11台大型仪器及相应小型辅助设备和设施(参见表8-1),被用来满足不同实验样品、分辨率水平、扫描深度及分析速度的需求。另外还配备IPP、Imaris、AutoQuant三大高效通用图像分析软件,以及FlowJo流式数据分析软件,可以根据实验的需求,对所取得的数据进行荧光定量分析、三维图像处理、反卷积等运算,并对流式样本数据进行多色分析、细胞周期分析、荧光补偿调节、批处理等。各个模块之间既是相对独立的,又可以结合不同的实验手段,对蛋白质的时空定位、相互作用、统计分析结果等进行相互印证,以综合研究蛋白质在生命活动中的功能。(www.xing528.com)
表8-1 复合激光显微镜系统的功能模块及设备构成图
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