传习所的创办人深知“名师出高徒”的教育法则和昆曲艺术传承的内在规律，深知师资水平的优劣直接关乎昆曲教育的兴衰成败。因此，在教职人员的挑选上，其要求远高过对于生源的要求。传习所先后延请原全福班老艺人沈月泉、沈斌泉、吴义生、许彩金、尤彩云、陆寿卿、施桂林等人为主教老师，高步云为助教和笛师，蔡菊生任笛师。概括地说，这样的师资配备，具有以下两大优势特点：
（一）名师即名伶
传习所的艺师，大多出身昆曲世家，沈月泉和沈斌泉为昆曲名家沈寿林之子，许彩金为沈寿林之内侄，吴义生为昆曲名老外吴庆寿之子，陆寿卿的祖父陆老四和父亲陆荣祥均为昆班著名净角，施桂林为名旦施松福之子。而且，传习所开班之后，他们亦将自己的子侄亲属再送来学艺，代代相传。由于家学技艺精湛，自小耳濡目染，传习所的艺师们在从艺生涯中都较早地显露出昆曲表演的潜质，并且逐渐成长为优秀的表演人才，之后皆作为台柱演员长期搭班全福班演出。因此，他们在受聘于传习所之前，本身都已是表演技艺娴熟的知名演员，艺术造诣深厚，深谙舞台实践。
“大先生”沈月泉（1865—1936），原名全福（泉福），原苏州全福班小生名角，初入小堂名[2]班，师承著名翎子生吕双全，工冠生、翎子生、巾生和鞋皮生，有“小生全才”美称，所演《荆钗记·见娘》《惊鸿记·吟诗、脱靴》《连环计·梳妆、掷戟》《彩楼记·拾柴、泼粥》《永团圆·击鼓、堂配》等戏，著称一时。
“二先生”沈斌泉（1867—1926），原名多福，师承名副曹宝林，工副，兼演小面、白净，能戏颇多，别具一格，以冷隽见长，尤擅方巾丑戏，所演《绣襦记·乐驿》《跃鲤记·芦林》《西楼记·拆书》《义侠记·借茶》等戏，描摹人物入木三分。
吴义生（1880？—1931），工老外，兼演老旦，人称“老外旦”。据徐凌云说法，吴之技艺并非其父传授，而是自学钻研所成，演唱、念白、表演俱佳，被昆曲界公认为首屈一指的外角，其经典剧目有《牡丹亭·闹学》《如是观·交印》《浣纱记·寄子》《满床笏·纳妾、跪门》等等。
许彩金（1877—1924），艺名小彩金，师承著名正旦陈四，又随名旦丁兰荪学艺。他初工六旦，后主正旦、四旦，擅演《西厢记》中的红娘、《千钟戮》中的女解差、《白兔记》中的李三娘、《琵琶记》中的赵五娘、《金锁记》中的曹七巧、《雷峰塔》中的白素贞、《义侠记》中的潘金莲等角色。
尤彩云（1887—1955），艺名小彩云，幼习堂名，后师承作旦陈聚林，又从名旦葛小香、丁兰荪，五旦、六旦、正旦皆擅长，为全福班后起之秀。他扮相秀丽端庄，嗓音清丽甜润，表演以细腻文静见长，著称的角色有《义侠记·挑帘、裁衣》中的潘金莲、《孽海记·思凡》中的色空、《呆中福》中的葛巧姐等。
陆寿卿（1869—1929），先工白净，后从名副曹宝林改习副角（二面），戏路宽广，各路副、丑、白净戏，无所不精。代表剧目有《水浒记·借茶、活捉》（饰张文远）、《义侠记·挑帘、裁衣》（饰西门庆）、《儿孙福·势僧》（饰势僧）、《渔家乐·渔钱》（饰赵大）、《西厢记·游殿》（饰法聪）、《浣纱记·回营》（饰伯嚭）等等。
施桂林（1876—1943），艺名小桂林，得自家技艺真传，工四旦、六旦，兼擅作旦，某些五旦戏亦能应工。他演出的拿手戏《衣珠记》（饰荷珠）、《翡翠园》（饰赵翠儿）、《西厢记》（饰红娘）、《蝴蝶梦》（饰田氏），合称为“衣翡西湖”，被昆曲界广为称道。(www.xing528.com)
（二）一师兼多职
传习所的艺师们，不仅仅只擅长一个行当，他们往往对其他行当也相当精通，因此在教学之时身兼多职，尤以首席教师沈月泉为代表。入所之前，沈氏就曾经有过教学经历，当过“拍先”[3]，为曲友拍曲、踏戏，并亲授名曲家张紫东、贝晋眉、俞振飞、王茀民等人的台步和身段。入所之后，沈氏不但主教小生行当，而且还担任其他行当的教师。他传授顾传玠、周传瑛小生戏，也教施传镇老生戏、朱传茗五旦戏、邵传镛净角戏、华传浩丑角戏以及沈传芷的正旦戏。沈月泉除了是“小生全才”，同时也是“六场通透的全才”，他培养出来的“传字辈”弟子都熟谙工尺谱，能吹奏笛子，并且掌握其他各种乐器。
除了“大先生”之外，其他几位先生也同样身兼数职，传授几个行当的剧目。“二先生”沈斌泉，主教副、丑、净。吴义生主教老外、老生、老旦，尤彩云主教六旦、五旦和正旦，陆寿卿主教副、丑、白面和大面，施桂林主教六旦和四旦。其中，许彩金因故半年后离开传习所，因此他教学的剧目和学生都较少。
由于一位教师身兼数个行当的教习任务，因此，学生在学习的时候，也不局限于一个行当，不限定为向一个教师学习，有的学生甚至初学某一行当，到了后来又改学另一行当，可归纳为“一人转益多师”。除此之外，还有“多师合授一戏”的情况。传习所的艺师们在全福班之时，彼此就是默契合作的搭档，因此在传习所教学过程中，必然也是相互合作、相得益彰。比如，施桂林、吴义生、陆寿卿三人就给学生们合授了全本的《衣珠记》《翡翠园》《昆山记》《寻亲记》《钗钏记》《南楼记》等。
传习所的师资配备，行当齐全、阵容强大，除了昆曲表演教师，所聘的笛师亦为名家，可谓一时之选。
高步云（1895—1984），幼小随父高森堂习昆曲堂名，后再从名师伍春如习艺，先后搭太仓合和堂、光裕堂堂名班。传习所成立后，随沈月泉入所，专工擫笛。高步云能拍曲、吹奏的曲牌达二三百支，其吹奏气满韵足，节拍分明，在传习所他协助沈月泉工作，担任第一位助教和笛师，为学生司笛拍曲、传授笛艺。
蔡菊生（1904—1929），曾在苏州金玉堂昆曲堂名学艺，工老生。1922年随师沈斌泉入传习所。他笛艺精湛，能吹曲目众多，后来一直担任“传字辈”演员演出时的主笛。之后，“传字辈”中的老生学员沈传锐夭折，蔡菊生主动继用其艺名，改名蔡传锐，称为唯一一位“传字辈”的后场人员。1929年，蔡传锐病逝，由蒋耕生继任主笛，此时“传字辈”演员已经出科演出，蒋便一直随班司笛。
昆曲课程以外，还开设文化课，分四班，聘请文学教师傅子衡、国文教师周铸九以及英语、算术教师孙卓人，教授文化基础知识。注重文化教育，是传习所的一大进步，这自然和创办人都是知识分子，而他们又都接受了一些新思想紧密相关。此外，还聘请了武术教师邢福海教授拳术等。
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