抑菌活性测定结果揭示惊人成果

2.12.1 抑菌圈测定

参考文献，采用牛津杯法，灭菌后在无菌操作台上待培养基凉至近室温时，加入已用无菌水稀释至1×107 CFU/mL 的菌悬液200 mL，迅速混匀并倒入培养皿，待培养基凝固后，每皿放3 个牛津杯，一个加200 mL 无菌水作为阴性对照，一个加200 mL 浓度为50 mg/L 的氨苄青霉素钠作为阳性对照，另一个加200 mL 浓度为0.5 g/mL 的样品溶液，然后正置于37℃恒温培养箱中培养16～18 h，检查结果并用游标卡尺测定抑菌圈，取其平均值，每样重复做4 个，其中对照品和样品在加入前都过0.22 μm 无菌滤膜，所做样品为大孔吸附树脂纯化后产物，结果见表3。

2.12.2 最小抑菌浓度（MIC）测定(www.xing528.com)

参考文献，采用试管二倍稀释法，用营养肉汤培养基（0.5 mL/管）将以0.5 g/mL为初始浓度的药物倍比稀释成系列浓度（即250 mg/mL、125 mg/mL、62.5 mg/mL、31.25 mg/mL、15.63 mg/mL、7.81 mg/mL、3.91 mg/mL、1.95 mg/mL、0.98 mg/mL、0 mg/mL），然后各管加入0.5 mL 浓度为1×106 CFU/mL 的菌液，使每管最终菌液浓度约为5×105 CFU/mL。另设药物对照（药物+营养肉汤）、培养基对照（营养肉汤），在37℃恒温水浴振荡器中培养18～24 h，以浑浊度为指标检查管中有无细菌生长，眼观选出不浑浊试管，分别取其液体200 μl 涂布于琼脂平板培养基上，于恒温培养箱培养24 h，观察结果。琼脂平板培养基上无细菌生长而含药液浓度最低者，即为该种药物对该菌株的最低抑菌浓度。氨苄青霉素钠阳性对照的做法同样品，但初始浓度为50 mg/L。结果见表4。