XDA-1大孔吸附树脂纯化过程|竞新集

XDA-1 大孔吸附树脂经预处理后，精密量取10 mL，采用湿法装于玻璃柱（15 mm × 150 mm），1 BV=10 mL，供下列动态工艺用。

2.10.1 样品浓度对吸附和解吸附的影响

用湿法装柱5 根，将2.2.2 制备的样品溶液稀释配制成浓度分别为0.01 g/mL、0.03 g/mL、0.05 g/mL、0.07 g/mL、0.09 g/mL 的溶液，在相同条件下分别以4 BV/h的流速上样于5 根柱中，使树脂达到饱和［饱和判断：TLC 检测（用HSGF254 薄板，展开剂：乙酸乙酯、甲醇、水的比例为20∶2∶1；显色方法：紫外线254 nm），当上样流出液中龙胆苦苷的含量与上样原液相当，说明树脂柱已达到吸附饱和。下同］，然后用蒸馏水以2 BV/h 的流速洗涤至α-萘酚浓硫酸反应无紫色环，说明水溶性杂质已被洗完，每柱用水3 BV，再用30%的乙醇以3 BV/h 的流速进行解吸附，至最后的流出液中用TLC 检测无龙胆苦苷，分别收集上样流出液、水洗液和解吸液，合并上样流出液和水洗液，分别精密吸取合并液和解吸液少量，用甲醇稀释并定容至一定体积，按照2.8 项方法，进行总苷含量测定，剩余合并液和解吸液分别在60℃以下减压浓缩成干浸膏，称重，计算吸附容量、解吸率及总苷含量，结果见图2。

计算公式：

2.10.2 上样流速对吸附量的影响

将按2.10.1 项筛选出的最佳样品浓度作为上样浓度，分别以2 BV/h、4 BV/h、6 BV/h、8 BV/h、10 BV/h 的流速在相同的大孔吸附树脂柱上进行吸附，使树脂达到饱和，然后用水以2 BV/h 的流速洗涤至α-萘酚浓硫酸反应无紫色环，共用水3 BV，再用30% 的乙醇以3 BV/h 的流速进行解吸附，至最后的流出液中用TLC检测无龙胆苦苷，分别收集上样流出液、水洗液和解吸液，合并上样流出液和水洗液，分别精密吸取合并液和解吸液少量，用甲醇稀释并定容至一定体积，按照2.8 项方法，进行总苷含量测定，剩余合并液和解吸液分别在60℃以下减压浓缩成干浸膏，称重，计算吸附容量，结果见图3。

2.10.3 上样pH 值对吸附量的影响

将按2.10.1 项和2.10.2 项筛选出的最佳样品浓度和上样流速作为上样浓度和流速，将上样液用稀酸或稀碱调pH 值分别为5、6、7、8、9，分别在相同的大孔吸附树脂柱上进行吸附，使树脂达到饱和，然后用水以2 BV/h 的流速洗涤至α-萘酚浓硫酸反应无紫色环，共用水3 BV，再用30% 的乙醇以3 BV/h 的流速进行解吸附，至最后的流出液中用TLC 检测无龙胆苦苷，分别收集上样流出液、水洗液和解吸液，合并上样流出液和水洗液，分别精密吸取合并液和解吸液少量，用甲醇稀释并定容至一定体积，按照2.8 项方法，进行总苷含量测定，剩余合并液和解吸液分别在60℃以下减压浓缩成干浸膏，称重，计算吸附容量，结果见图4。

2.10.4 上样量考察

将按2.10.1 项至2.10.3 项筛选出的最佳样品浓度、上样流速及上样pH 值作为上样条件进行吸附，按树脂床体积收集流出液，按照2.8 项方法，进行总苷含量测定，计算吸附容量，结果见图5。(www.xing528.com)

2.10.5 解吸液浓度考察

用湿法装柱4 根，将按2.10.1 项至2.10.4 项筛选出的最佳样品浓度、上样流速、上样pH 及上样量作为上样条件进行上柱吸附，然后用水以2 BV/h 的流速洗涤至α-萘酚浓硫酸反应无紫色环，共用水3 BV，再分别用10%、30%、50%、70%的乙醇以3 BV/h 的流速进行解吸附，至最后的流出液中用TLC 检测无龙胆苦苷，分别收集上样流出液、水洗液和解吸液，合并上样流出液和水洗液，分别精密吸取合并液和解吸液少量，用甲醇稀释并定容至一定体积，按照2.8 项方法，进行总苷含量测定，剩余合并液和解吸液分别在60℃以下减压浓缩成干浸膏，称重，计算解吸率及总苷含量，结果见表1。

2.10.6 解吸附流速对洗脱率影响的考察

用湿法装柱5 根，将按2.10.1 项至2.10.4 项筛选出的最佳样品浓度、上样流速、上样pH 值及上样量作为上样条件进行上柱吸附，然后用水以2 BV/h 的流速洗涤至α-萘酚浓硫酸反应无紫色环，共用水3 BV，再用2.10.5 项筛选出的流动相分别以1 BV/h、3 BV/h、5 BV/h、7 BV/h、9 BV/h 的流速进行解吸附，至最后的流出液中用TLC 检测无龙胆苦苷，分别收集上样流出液、水洗液和解吸液，合并上样流出液和水洗液，分别精密吸取合并液和解吸液少量，用甲醇稀释并定容至一定体积，按照2.8 项方法，进行总苷含量测定，剩余合并液和解吸液分别在60℃以下减压浓缩成干浸膏，称重，计算解吸率及环烯醚萜苷含量，结果见图6。

2.10.7 流动相pH 值对洗脱率影响的考察

用湿法装柱5 根，将按2.10.1 项至2.10.4 项筛选出的最佳样品浓度、上样流速、上样pH 值及上样量作为上样条件进行上柱吸附，然后用水以2 BV/h 的流速洗涤至α-萘酚浓硫酸反应无紫色环，共用水3 BV，再将2.10.5 项筛选出的流动相用稀酸或稀碱调pH 值分别为5、6、7、8、9，以2.10.6 项筛选出的最佳洗脱流速分别进行解吸附，至最后的流出液中用TLC 检测无龙胆苦苷，分别收集上样流出液、水洗液和解吸液，合并上样流出液和水洗液，分别精密吸取合并液和解吸液少量，用甲醇稀释并定容至一定体积，按照2.8 项方法，进行总苷含量测定，剩余合并液和解吸液分别在60℃以下减压浓缩成干浸膏，称重，计算解吸率及环烯醚萜苷含量，结果见图7。

2.10.8 洗脱终点的考察

用湿法装柱，将按2.10.1 项至2.10.4 项筛选出的最佳样品浓度、上样流速、上样pH 值及上样量作为上样条件进行上柱吸附，然后用水以2 BV/h 的流速洗涤至α-萘酚浓硫酸反应无紫色环，共用水3 BV，再以2.10.5 项至2.10.7 项筛选出的最佳洗脱条件进行解吸附，按树脂床体积收集解吸液，精密吸取一定量，再用甲醇稀释并定容至一定体积，按照2.8 项方法，进行各流出液含量测定，计算流出液浓度，结果见图8。