水处理中微生物的染色方法

微生物（尤其是细菌）的机体是无色透明的，在显微镜下，由于光源是自然光，使微生物体与其背景反差小，不易看清微生物的形态和结构，若增加其反差，微生物的形态就可看得清楚。通常用染料将菌体染上颜色以增加反差，便于观察。

微生物细胞是由蛋白质、核酸等两性电解质及其他化合物组成。所以，微生物细胞表现出两性电解质的性质。两性电解质兼有碱性基和酸性基，在酸性溶液中离解出碱性基呈碱性带正电。在碱性溶液中离解出酸性基呈酸性带负电。经测定，细菌等电点在pH=2～5之间，故细菌在中性（pH=7）、碱性（pH＞7）或偏酸性（pH=6～7）的溶液中，细菌的等电点均低于上述溶液的pH值，所以细菌带负电荷，容易与带正电荷的碱性染料结合，故用碱性染料染色的为多。碱性染料有美蓝、甲基紫、结晶紫、龙胆紫、碱性品红、中性红、孔雀绿和蕃红等。

微生物体内各结构与染料结合力不同，故微生物的各结构可用各种染料分别染色以便观察。

8.1.2.1　简单染色法

简单染色法又叫一般染色法，只用一种染料使细菌染上颜色，如果仅为了在显微镜下看清细菌的形态，用简单染色法即可。(www.xing528.com)

常用碱性染料进行简单染色。因为在中性、碱性或者弱碱性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，因此染料发染色部分很容易与细菌结合着色。常用于简单染色的染料有：美蓝、结晶紫、碱性晶红、孔雀绿和蕃红等。

8.1.2.2　革兰氏染色法

用两种或多种染料染细菌，目的是为了鉴别不同性质的细菌，所以又叫鉴别染色法。主要的复染色法有革兰氏染色法和抗酸性染色法。抗酸性染色法多在医学上采用。此处介绍革兰氏染色法。革兰氏染色法是细菌学中很重要的一种鉴别染色法。它可将细菌区别为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类。之所以有不同的结果是因为细胞壁结构和组成的差异造成的。革兰氏阳性菌的细胞壁中脂类物质含量较高，肽聚糖含量较低。染色时乙醇溶解了脂类物质，使细胞壁通透性增加，结晶紫—碘复合物易被抽出，于是被脱色，复染是染上番红的颜色。革兰氏阳性菌细胞壁中肽聚糖含量较高，脂类物质含量较低，结晶紫—碘复合物被保留在细胞内，细胞不被脱色，保持初染的紫色。

它的染色步骤如下：先用草酸铵结晶紫染色，经碘——碘化钾（媒染剂）处理后用乙醇脱色，最后用蕃红液复染。如果细菌能保持草酸铵结晶紫与碘的复合物而不被乙醇脱色，用蕃红液复染后仍呈紫色者叫革兰氏阳性菌。被乙醇脱色用蕃红液复染后呈红色者为革兰氏阴性菌。