垂直电泳槽工作原理及优势

1.仪器介绍及用途

垂直电泳槽(图3-32)应用于生物学研究中,如对核酸、蛋白样品的分离、纯化、制备等,同时适用于核酸电泳。

图3-32　垂直电泳槽

2.工作原理

电泳是电泳涂料在施加于阴阳两极的电压的作用下,带电荷的涂料离子移动到阴极,并与阴极表面所产生的碱性物质作用形成不溶解物,沉积于工件表面。

3.使用方法

(1)将凝胶密封条框放在平板上,然后将凹型玻璃板与平板玻璃重叠。

(2)将两块玻璃立起来使其底端接触桌面,用手将两块玻璃板夹住放入电泳槽内,然后插入斜楔板(直面对玻璃,斜面对槽)到适中程度,即可灌胶。(www.xing528.com)

(3)凝胶凝结后,轻轻取下梳子。

(4)用手夹住两块玻璃板,上提斜楔板,使其松开,然后取下玻璃胶室,去掉凝胶密封框,注意在上述过程中手始终给玻璃胶室一个压紧力,再将玻璃胶室凹面朝里置入电泳槽,插入斜楔板,将缓冲液加至内槽玻璃凹口以上,外槽缓冲液加到距玻璃上沿3mm处即可电泳,注意避免在胶室下端出现气泡。

(5)加样时可用加样器斜靠在提手边缘的凹槽内,以准确定位加样位置。盖好上盖,在电压150V以下进行电泳分离,根据指示剂位置确定电泳时间。电泳结束后,关掉电源,按住本体提手,打开上盖,拔掉固定板,取出玻璃板,用刀片或薄板轻轻将玻璃夹层分开。本电泳槽同时可进行双板电泳,如果只跑一块胶时,需要在另外一侧用单胶替代板代替玻璃。

4.注意事项

(1)安装阳极电解池和阳极,装配前必须用去离子水将电解池和阳极洗干净。

(2)在装配后必须向阳极池中灌注部分去离子水,这样能防止它们上浮,也有助于电泳槽装槽时的压力平衡。

(3)当涂料供应商验证槽子已经干净后,可以按照它的说明书装槽。去离子水、树脂、乳液、溶剂、酸和颜料的加入量都有说明。

(4)在装槽后,可以开动超滤器,要按照超滤器供应商的说明书上的程序来启动超滤器。

(5)在其他工序洗干净和调整好pH后,也可以用去离子水装槽,同时注入涂料供应商指定的溶剂,这样所配制的液体是将作为水洗用的超滤液液体。