电泳仪：工作原理及分离效果

1.仪器介绍及用途

电泳仪(图3-31)主要用途是分离、鉴定,也可以纯化。

图3-31　电泳仪

2.工作原理

区带电泳需用各种类型的物质作为支持物,常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶-G薄层等。分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳。所谓电泳,是指带电粒子在电场中的运动,不同物质由于所带电荷及相对分子质量的不同,因此在电场中运动速度不同。根据这一特征,应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析,或将一定混合物进行组分分析或单个组分提取制备,这在临床检验或实验研究中具有极其重要的意义。电泳仪正是基于上述工作原理设计制造的,依据分子或颗粒所带的电荷、形状和大小等不同,因而在电场介质中移动的速度不同,从而达到分离的目的。

3.使用方法

(1)首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端连接,注意极性不要接反。

(2)电泳仪电源开关调至关的位置,电压旋钮转到最小,根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。(www.xing528.com)

(3)接通电源,缓缓旋转电压调节钮直到达到所需电压为止,设定电泳终止时间,此时电泳即开始进行。

(4)工作完毕后,应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状态,并拔出电泳插头。

4.注意事项

(1)电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳物及其他可能带电部分,也不能到电泳槽内取放东西,如需要应先断电,以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端,以防漏电。

(2)通电后,不要临时增加或拔除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然仪器内部附设有保险丝,但短路现象仍有可能导致仪器损坏。

(3)由于不同介质支持物的电阻值不同,电泳时所通过的电流量也不同,其泳动速度及泳至终点所需时间也不同,故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。

(4)在总电流不超过仪器额定电流时(最大电流范围),可以多槽关联使用。但要注意不能超载,否则影响仪器寿命。

(5)某些特殊情况下需检查仪器电泳输入情况时,允许在稳压状态下空载开机。但在稳流状态下必须先接好负载再开机,否则电压表指针将大幅度跳动,容易造成不必要的人为机器损坏。

(6)使用过程中发现异常现象,如较大噪音、放电或异常气味,须立即切断电源,进行检修,以免发生意外事故。