（1）不脱钙法提取骨骼DNA：锯骨头一块，骨松质时10～20 mg，骨密质时75～100 mg。用手术刀片、砂纸等物理方法刮除表面软组织和垢物。自来水冲洗干净。蒸馏水冲洗1次。无水乙醇及乙醚中各浸泡15 min，晾干。液氮中15～30 s，压成粉末。取20～50 mg骨粉，加入5 mLTNE（0.5 mol/LEDTA，10 mmol/LTris-HClpH8.0，100 mmol/LNaCl，0.5%Tween20），内含蛋白酶K终浓度200μg/mL。55℃，5～6 h后补加10 mg/mL蛋白酶K 20μL，55℃过夜。常规饱和酚三氯甲烷法提取DNA。若提取DNAOD260/OD280＜1.5时，则应再用饱和酚三氯甲烷重复抽提1次。
或取1.5 g骨粉，加入3 mL白细胞溶解液（10 mmol/LTris-HClpH7.6，10 mmol/LEDTANa2，50 mmol/LNaCl），25μL蛋白酶K（20 mg/mL），50μL SDS，42℃过夜。加入1 mL饱和乙酸钠，振动30 s，4 000 g离心10 min。吸上清液于另一试管中，加入4 mL100%异丙醇，混合10 min以上。4 000 g离心10 min，37℃干燥沉淀后用250μL蒸馏水溶解，-80℃保存备用。(www.xing528.com)
（2）脱钙法提取骨骼DNA：取2 g骨，彻底清洁，去除外层杂质，制成粉末（越细越好），置于15 mL试管中。分别用8 mL0.5 mol/L EDTApH7.5缓冲液脱钙3次，共约8～12 h。dd H2O洗涤3次，去除EDTA。沉淀中加入3 mL预热Buffer（10 mmol/LTris-HClpH8.0，100 mmol/LNaCl，2%SDS，10 mmol/LEDTA，含0.5%mg/mL蛋白酶K），56℃12～18 h，后补加蛋白酶K至浓度1 mgL/mL，再56℃5 h。离心弃沉渣，上清液移于另一试管内。用酚/三氯甲烷/异戊醇（25∶24∶1）脱蛋白，后用乙醚抽提微量酚，56℃15 min去除乙醚。水相过Centricon30柱。
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