希特勒被南斯拉夫“3·27”事件深深地刺痛，盛怒之下，他在当日下午两点半，即在贝尔格莱德街头政变的枪声响过12个小时之后，马上召集德国最高统帅部成员开会。希特勒在会上声称，南斯拉夫的政变危及了德国进攻希腊的“马丽塔计划”和进攻苏联的“巴巴罗萨”的实施，因此，他要以“无情的严厉行动”粉碎南斯拉夫。希特勒曾经因塞尔维亚打响了第一次世界大战的第一枪而斥其为“塞尔维亚叛徒”，“3·27”事件似乎使希特勒有了报仇的机会。
根据1940年12月进攻希腊的“马丽塔”行动和1940年12月18日制订的入侵苏联的“巴巴罗萨”计划，预定是5月15日开始军事行动。由于希腊人民英勇抗击意大利侵略军和南斯拉夫人民坚决反对加入三国公约，法西斯侵略者不得不变更他们的战争日程表。
希特勒原先精心设计的用施加压力和签订条约使巴尔干国家就范，并进而侵入苏联的计划，也需要从根本上进行修改。“二战”后的研究成果揭示，预定参加对苏联战役的11个德国师在4月17日南斯拉夫投降10天内转移去实施“巴巴罗萨”计划。但是，由于南斯拉夫事态的发展，原定在5月12日发动对苏战争的日期被推迟到了6月22日，整整拖延了6周。这使法西斯德国丧失了战机，遇上了莫斯科严寒的冬天。战后，德国将领们和苏联学者都承认这一现实。
希特勒欲在进攻希腊的同时，一举消灭南斯拉夫。他作出这一决定不完全在于军事目的。他如此行动，一方面是为了震慑苏联和土耳其，显示德国的军事实力；另一方面是为了加强与那些将从南斯拉夫获得部分领土的盟友的团结。
会议刚结束，希特勒就在4月初向各高级将领发出了进攻和消灭南斯拉夫王国的命令，史称“第25号指令”，行动的理由是：
南斯拉夫对于预定的“马丽塔”作战方案是一个不稳定的因素，而对往后的“巴巴罗萨”计划更是如此。
不必等待南斯拉夫新政府表明忠诚，立即做好一切准备，以期在军事上粉碎南斯拉夫，使其不再成为一个国家……空军的任务要尽可能提早行动，摧毁南斯拉夫的空军基地。
南斯拉夫的军事叛变已经改变了巴尔干的政局。即使南斯拉夫主动表示效忠，但目前必须把它视为敌人，因此必须尽快予以摧毁。
在这个指令中，希特勒还预计需要意大利、匈牙利和保加利亚军队的协调行动。他说：
为此，必须尽快行动，邻国要以积极的方式参加。只要求意大利和匈牙利在军事上帮助对付南斯拉夫，而在某种意义上也需要保加利亚协助。罗马尼亚的主要任务是防止俄国。[3]
3月28日，希特勒将进攻南斯拉夫的计划告诉了意大利、匈牙利、保加利亚等国，称德国将在几天之内消灭南斯拉夫并允许克罗地亚获得独立。当晚，希特勒通知墨索里尼暂时停止在阿尔巴尼亚的军事行动，把军队向南斯拉夫边界集结。
第二次世界大战后解密的档案透露了“第25号指令”的一些内容：(www.xing528.com)
1. 将奥地利驻守在科鲁什卡和什塔尔斯卡边界地区的部队并入德国军队；
2. 克罗地亚将成为独立国家，由匈牙利管控；
3. 南斯拉夫西北部沿海地区、达尔马提亚和黑山属于意大利；
4. 马其顿应该归还保加利亚；
5. 南斯拉夫与匈牙利接壤的部分领土(到德拉瓦河)交给匈牙利；
6. 只有老塞尔维亚(不包括马其顿)由德国军事当局临时管理。
1946年4月1日，在纽伦堡法庭上，当英国法官问到纳粹战犯为什么还没有动用完外交手段，就迫不及待打击南斯拉夫时，里宾特洛甫回答说：
因为南斯拉夫新政府是由英国扶植建立的。这是英国军官在审讯我时，其中一个军官承认的事实。西莫维奇将军政变后，元首看得很清楚，新政府的幕后都是德国的敌人。
“第25号指令”计划从北面的格拉茨、西边的里耶卡和东边的索非亚同时发起进攻，朝贝尔格莱德方向靠拢，以迅速消灭王国的军队。同时，把南斯拉夫的南部分割开，在那里建立德意侵略军进攻希腊的基地。
在军事上进行紧急部署的同时，法西斯德国对南斯拉夫发动了政治和外交攻势。西莫维奇政府对希特勒的调兵遣将活动和入侵计划并非一无所知。早在政变两三天后，南斯拉夫王国驻柏林大使馆的武官就已经提醒过西莫维奇政府，要注意德国的侵略动向。但奇怪的是，它仍在幻想和平。直到4月3日，新政府才开始秘密动员，并计划4月7日实行总动员。这比希特勒的准备工作晚了一周，结果，瞬息万变的事态发展把南斯拉夫推到了灾难的深渊。
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