【摘要】:此外,为了实现极限分辨率,共焦显微镜系统必须配备防振工作台。这使得通过共聚焦扫描显微镜得到的样品图像对比度比传统显微镜的要高。
1.分辨率
共聚焦显微镜的系统点扩散函数分布等于物镜和点像能量分布的卷积。在物镜相同的情况下,其横向分辨率(x-y 面)比传统光学显微镜提高了1.4 倍,达到0.4λ/NA,如Leica公司的TcS-NT 分辨率为0.18 μm。从共焦显微镜的原理可知,探测器处针孔的设置不仅有效抑制了离焦面点像对检测平面像的干扰,同时抑制了准焦面上非探测点对探测点的干扰,极大地改善了图像的分辨率。此外,为了实现极限分辨率,共焦显微镜系统必须配备防振工作台。
2.灵敏度
传统光学显微镜上常配备CCD 相机来采集图像,但由于CCD 的灵敏度比较低,对于低照度的光,如荧光无法探测到,因此在共焦显微镜系统中一般使用光电倍增管作为探测元件,其灵敏度大大超过CCD,对微弱的荧光信号也可以呈现出很高的灵敏度。
3.横向分辨率(www.xing528.com)
共焦显微镜系统所展现的放大图像细节要高于常规的光学显微镜。此处所说的放大不是指物理上的放大,而是指在相同物镜放大的条件下,共焦显微镜所展示的图像形态细节是在传统光学显微镜下很难看到的,因而图像更清晰更微细,横向分辨率更高。
4.对比度
由于物体照明光仅是扫描中一个非常小的聚焦光点,且亮度、信噪比高,信号光要比物体其他点要强。在像面上,点探测器只能接收通过针孔的光,而来自物体其他部位的杂散光因在共焦针孔处不能聚焦而被滤除。这使得通过共聚焦扫描显微镜得到的样品图像对比度比传统显微镜的要高。
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