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蛋白质酶水解的关键步骤

时间:2023-07-01 理论教育 版权反馈
【摘要】:图9-12 pH-stat间歇式水解反应装置示意图一般来说,如果搅拌情况良好,蛋白水解反应与反应器的大小无关。实验室规模与工业级大规模蛋白质水解的主要区别在于水解结束后,产物的分离、回收和精制。因此,从理论上讲,图9-12所示水解装置同样适用于工业级蛋白质水解。以水解大豆蛋白制取等电点可溶大豆蛋白水解物为例,采用Alcalase蛋白酶,用pH-stat控制水解进度,水解参数如下:S=8%;E/S=12~24AU/kg;pH=8.0;T=50~55℃。

蛋白质酶水解的关键步骤

图9-12所示为pH-stat间歇式水解反应装置。

图9-12 pH-stat间歇式水解反应装置示意图

一般来说,如果搅拌情况良好,蛋白水解反应与反应器的大小无关。反应可自发地进行,体系中密度及热焓的变化可忽略不计,而质量传递以及快速升温等工程问题仅与维持pH恒定以及结束反应有关。实验室规模与工业级大规模蛋白质水解的主要区别在于水解结束后,产物的分离、回收和精制。因此,从理论上讲,图9-12所示水解装置同样适用于工业级蛋白质水解。

水解所需要控制的参数包括:体系总的质量m(g或者kg);底物浓度[S](%);酶—底物比E/S(酶活单位/kg);pH;和温度T(℃)。

以水解大豆蛋白制取等电点可溶大豆蛋白水解物(ISSPH)为例,采用Alcalase蛋白酶,用pH-stat控制水解进度,水解参数如下:S=8%(N×6.25);E/S=12~24AU/kg;pH=8.0;T=50~55℃。水解结束时DH=10%~14%。

如采用pH-stat方法,DH可根据下式得到:

式中 B——碱消耗量,mL或L(www.xing528.com)

Nb——碱浓度,mol/L

α——α-NH2的平均电离度

mp——蛋白质的质量(N×6.25)

如采用渗透压法,则首先测出冰点下降值,即ΔT,再根据公式算出渗透度的变化,即ΔC,最后算出DH,算式如下

式中 ω——渗透压系数

fosm——将S%转化为g/kg水的转换因子

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