微生物接种和培养技巧

将微生物的纯种或含有微生物的材料（如水、食品、空气、土壤、排泄物等）转移到培养基上的过程叫微生物接种。经微生物接种后的培养基被放置在一定环境条件下，使微生物在培养基上生长繁殖，这一过程叫作微生物的培养。

1.微生物的接种方法

（1）涂布法 将纯菌或含菌材料（包括固形物或液体）均匀地分布在固体培养基表面，或者将含菌材料在固体培养基的表面仅作局部涂布，然后再用划线法使它分散在整个培养基的表面。

（2）划线法 将纯种或含菌材料用微生物接种法在固体培养基表面进行划线，使微生物细胞能分散在培养基表面，并使接种量在培养基表面起着稀释的作用，即在培养基的单位面积内的接种量从多量逐渐依次减少为少量。划线法是进行微生物分离时的一种常规接种法。

（3）倾注法 取少许纯菌或少许含菌材料（一般是液体材料），先放入无菌的培养皿中，而后倾入已溶化并冷却至46℃左右含有琼脂的灭菌培养基上，使它与含菌材料均匀混合后，冷却使其凝固。

（4）点植法 将纯菌或含菌材料用接种针在固体培养基表面的几个点接触一下。点植法常用于霉菌的接种。

（5）穿刺法 用接种针将微生物纯种经穿刺而进入到培养基中去。穿刺法常应用于半固体深层培养基，通过穿刺进行培养，可以有助于探知这种菌种对氧的需要情况以及有无动力产生。(www.xing528.com)

（6）浸洗法 用接种针挑取含菌材料后，即插入液体培养基中，将菌洗入培养基内。有时也可将某些固形含菌材料直接浸入培养液中，把附着在表面的菌体洗下。

（7）活体接种 活体接种应用于病毒培养，因为病毒必须接种在生活的组织细胞中才能生长繁殖。如果要分离某些病原微生物或检查某些病原微生物的致病特性以及毒力测定时，一般用活的动物进行接种。

2.微生物的培养

人工培养微生物的过程中，除了供给一定的营养物质外，还必须提供微生物生长繁殖的条件，但因不同种类的微生物需要的条件不完全相同，所以就有需氧培养、厌氧培养等不同方式。

（1）需氧培养 对需氧微生物的培养必须在有氧的环境中进行。在试验室中，液体或固体培养基经接种微生物后，一般将其置于保温箱中在有氧的条件下培养。有时为了加速繁殖的速度或进行大量液体培养时，可用通气搅拌或振荡方法来充分供氧，但通入的空气必须经过净化或无菌处理。

（2）厌氧培养 培养厌氧性微生物时，要除去培养基中的氧或使氧化还原电位降低，并在培养过程中一直保持与外界氧隔绝以使厌氧微生物生长。在培养中保持无氧环境的方法有物理法除氧、化学法除氧和生物法除氧。