1.产品厂家及型号
厂家：美国wealtec,型号：V-GES垂直电泳槽,GES水平电泳槽。
2.产品特点
2.1 水平电泳仪(图4-6)
CE认证,全透明抗紫外线材质,耐用,方便实施监控电泳进度,不同大小的托盘可以应用在一个电泳槽中,电极容易更换,dams-claw专利便于精确制胶。
图4-6 水平电泳仪
2.2 垂直电泳仪(图4-7)
每一个内组件都可独自站立于电泳槽中,并非悬挂于电泳槽上方,以确保稳定性。 符合CE规范,电泳槽底部加装止滑垫,上方突出轴方便开启上盖,上盖内部及电泳座的防呆设计可确保配置错误的发生,电泳槽的材质为强化材质。
图4-7 垂直电泳仪
2.3 电源
短路、断电保护、异常电压、电流声音及视觉警示、LED显示(MINI除外),有时间控制器实时监控电压、电流,运行过程中可随时调整电压、电流,具有PFD(Programmable Frequency Divider)程序输出,设计紧凑,轻便。
3.用途
聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳是目前任何分子生物学实验室最常用的两种电泳方法。水平电泳主要用于分离、鉴定和纯化核酸(DNA或RNA)片段(琼脂糖凝胶电泳)、垂直电泳用于分离蛋白质和寡糖核苷酸(聚丙烯酰胺凝胶电泳)。
4.主要参数
4.1 垂直电泳槽V-GES/美国WEALTEC。
4.1.1 基本配置：电泳单元1个、缓冲液槽和盖各1个、灌胶模具2套、厚玻璃板5个、U型玻璃板5个、胶条4个和梳子2个、刮胶板1个、玻璃挡板1个、隔板1个、湿转单元。
4.1.2 同一槽内可同时进行1～2块SDS-PAGE凝胶的电泳实验。
4.1.3 胶面积8×10 cm,厚玻璃板和U型板8×10 cm,玻璃板之间有不同厚度的胶条。
4.1.4 胶条厚度：0.5/0.75/1.0 mm可同10/15齿梳子配套使用。
4.1.5 样品数量：10～30,内部缓冲液体积：250～300 mL,外部缓冲液体积：500～1400 mL。
4.1.6 Casting Module灌胶模具：独创防漏橡皮设计,侧翼打开装置替代了传统螺丝装置,稳定且节省空间设计,便于移动凝胶三明治夹。
4.1.7 Electrode Module电泳单元：放置凝胶三明治夹的竖板使之定位更准确,扣紧—放开的专利设计,透明门便于观察,取下凝胶三明治夹时无滴水。
4.2 水平电泳槽GES/美国WEALTEC。
4.2.1 基本配置：制胶盘、电泳梳子、缓冲液槽和盖。(www.xing528.com)
4.2.2 电泳槽尺寸：27×17.5×10 cm,可置换的L形铂金丝。
4.2.3 电泳槽胶盘尺寸可选：7×15 cm、10×15 cm、15×15 cm。
4.2.4 一次可作40个样品,缓冲液体积650～1000 mL。
4.2.5 凝胶盘为可透射紫外光的材质制成。
4.2.6 或20齿的梳子可选不同的厚度0.75/1.0/1.5 mm。
4.3 推荐电源：ELITE300PLUS/美国WEALTEC。
4.3.1 特点：紧凑可堆叠、节省空间、轻便,4个输出终端设计满足多通量需求,实时显示运行状况：电压、电流和时间,触摸式面板进行条件设定,运行期间可改变设定。
4.3.2 安全：可听和可视警报设计,断电后自动恢复,无负载,突发负载和过电压保护。
4.3.3 技术规格见表4-4。
表4-4 ELITE300PLUS/美国WEALTEC技术规格
5.操作规程
5.1 器具清洗：首先将配胶、电泳、染胶所需要的器具清洗干净,包括托盘、胶托、梳子、电泳槽、染胶盘(染液污染,需独立清洗)。清洗流程为：先用自来水冲洗三次,然后用纯水冲洗三次,最后用纸巾或医用纱布擦干。若需对电泳产物进行胶回收,则还需用75%酒精对器具进行消毒。
5.2 配胶：根据基因组片段大小,配置相应浓度的琼脂糖凝胶。首先将锥形瓶洗干净并加入少量纯水煮沸,然后量取一定量的电泳缓冲液(1×TAE)至锥形瓶中,再称取相应量的琼脂糖倒入锥形瓶中,摇匀并用锡纸封口,最后放入微波炉煮,煮胶的过程中需注意安全,应适当摇匀,防止爆沸。煮好的凝胶需无气泡、色泽均匀。将煮好的凝胶放入65℃的水浴锅中,待凝胶冷却至65℃时,及时将凝胶倒入装好的干净模具中。待凝胶完全凝固后,将凝胶小心转移至4℃冰箱,冷冻30 min,然后拔梳子。此时,凝胶需平整、不漏孔,可以用于电泳检测。
5.3 电泳准备：先将干净的电泳槽排放整齐并做好标记,然后把凝胶连同胶托一起放入电泳槽正中央,胶孔的方向朝向负极(注意：①放凝胶前,需将胶托底部的凝胶抹干净,防止胶托在电泳槽中滑动;②此时,可顺便观察凝胶是否漏孔),再往电泳槽中倒入一定量的电泳缓冲液(1×TAE)至刚好将凝胶淹没。(注意保持桌面卫生,防止缓冲液洒到桌面)。
5.4 上样：将样品轻甩后按照规定的顺序上样,上样顺序应与电泳槽上的标记一致,最后点上一定量的Ladder。(注意：①上样时必须确保上样顺序正确无误,样品间不混淆,点样后的空管子先放在电泳槽旁边,用于核查：②点样时不戳孔、不外漏、不溢出;③点样时需小心枪头不要碰到凝胶,以免凝胶挪动,若凝胶已经挪动,需等样品完全沉到底部后,再固定凝胶)
5.5 电泳：确认已经正确上样后,双手盖上电泳槽盖,接通电泳仪和电泳槽(注意：确认电极正确连接),设置电泳参数,注意确认电极、电泳参数完全正确之后,最后开始电泳。
5.6 染胶：电泳结束之后,带上PE手套,小心滑出凝胶,把凝胶转移到干净的PE手套上(注意：PE手套上应做好标记,确保样品、电泳槽、PE手套的标记是一致),小心地将凝胶放入相应标记的染胶盘中,根据染液要求染色。
5.7 凝胶成像：带上PE手套,将凝胶从染胶盘中捞出,放在染胶时的那个PE手套上(注意：捞胶时需小心防止凝胶断裂、滑落,尽量把多余的染液甩干),将凝胶放入凝胶成像系统中,按照“Tanon凝胶成像系统操作规程”进行操作拍照。
6.设备的维护及保养
6.1 电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳仪电泳物及其他可能带电部分,也不能到电泳仪电泳槽内取放东西,如需要应先断电,以免触电。同时要求电泳仪必须有良好接地端,以防漏电。
6.2 电泳仪通电后,不要临时增加或拔除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然电泳仪内部附设有保险丝,但短路现象仍有可能导致电泳仪损坏。由于电泳仪不同介质支持物的电阻值不同,电泳仪电泳时所通过的电流量也不同,其电泳仪泳动速度及泳至终点所需时间也不同,故电泳仪不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。
6.3 在总电流不超过电泳仪额定电流时(最大电流范围),可以多槽关联使用,但要注意不能超载,否则容易影响电泳仪寿命。
6.4 某些特殊情况下需检查电泳仪电泳输入情况时,允许在稳压状态下空载开机,但在稳流状态下必须先接好负载再开机,否则电压表指针将大幅度跳动,容易造成不必要的人为电泳仪损坏。
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