微量移液器简介及操作程序

(一)微量移液器简介

移液器又称移液枪,是一种用于定量转移液体的器具,被广泛用于生物、化学等领域和临床诊断实验室,生物技术实验室,药学和化学实验室,环境实验室,食品实验室的一种常用工具。原理就是通过弹簧的伸缩力量使活塞上下活动,排出或吸取液体,与传统的移液管相比其特点是准确性高、效率高、易操作、结构复杂、价格高。

1.移液器分类

(1)按移液是否手动来分：手动移液器、电动移液器。

(2)按量程是否可调来分：固定移液器、可调移液器。

(3)按排出的通道来分：单道、8道、12道、96道工作站。

(4)按灭菌情况可分为：半支灭菌、整支灭菌。

2.移液模式

(1)样品混匀模式。(2)反向吸液模式：该模式专为吸高黏度,高蒸汽压或发泡液体所设计。

(3)电泳上样模式：以设定的移液量会以较快可调的速度进行吸液,然后以较慢的速度进行排液,以免扩散。该模式在1000μL量程移液器时。

(4)分级移取模式：专为连续移取液体所设计,根据设定的移液次数和移液量进行。

3.移液器精确度的检测方法

(1)目视法检测：先使用需要检测的移液器吸取液体,然后将其垂直静置15 s,观察有没有液滴缓慢的流出。如果有液滴缓慢流出,就说明该移液器有漏气现象。

(2)压力泵检测：使用专用的压力泵,检测压力情况,判断移液器是否漏气。

如果发现移液器有漏气现象,首先,查看吸头是不是匹配。其次,装配吸头的时候有没有装紧,如果排除上述两种情况可能是移液器内部气密性出现问题,需与移液器公司维修工程师联系。此外,当移取液体的温度与吸头和移液器的温度不一致时也会准确性下降的情况,当液体温度高于吸头的,移取的液体体积会偏大,当液体温度低于吸头的,则移取的液体体积会偏小。液体样品的密度、使用方法是否得当均会影响移液的准确性。

(二)微量移液器操作程序

1.产品厂家型号

厂家：梅里埃ATB电子加样枪,型号：15710微量移液器。

2.产品主要参数

2.1　ATB电子加样枪可自动吸取混合均匀的菌悬液并按下列量的要求接种ID32和ATB试条：16×135μL;32×135μL;32×55μL;16×55μL。

2.2　电池：可反复充电的镍镉蓄电池;最大充电时间：空电池充10 h。

2.3　ATB电子加样枪使用的周期包括。

2.3.1　混匀过程：通过对液体的三次吸入和两次放出。

2.3.2　分配过程：可编辑为连续分配或步进分配模式。

2.3.2.1　连续分配模式：　在用户进行加样杯数和每杯分配量预设后,加样枪可在无操作者干扰下自动加样到每个反应杯。

2.3.2.2　步进分配模式：在用户进行加样杯数和每杯分配量预设后,操作者指示每个反应杯的加样。

3.操作程序

3.1　加样器描述

3.1.1　液晶显示器(图2-27)

图2-27　液晶显示器

向右的箭头“▶”表示下一个动作为“吸取”液体;向左的箭头“◀”表示下一个动作为“分配”或“释放”液体。左显示屏显示器的这个部分可以看到三个不同信息：

①使用前或当加样器在充电座上时：有数字显示表示分配程序的分配数：16或32。当加样完成后,数字被字母“E”代替。

②接种期间,剩余分配数会显示在界面上。

③当设置连续分配的间隔时间时,数字显示两次有效接种的间隔时间。右显示屏这个部分显示每孔分配量：55μL或135μL。“*”标记出现在两部分显示屏的中间,表示设置为连续分配。

3.1.2　键盘

键盘包括六个键,如图2-28。

图2-28　键盘

M：选择被接种的模式。(接种的杯数及每杯的接种量);

S：连续分配时,设置接种速度(间隔时间);

数字显示值加1;

数字显示值减1;

*：选择接种模式：连续自动加样或步进式加样;

E：进行初始化或选择参数后确认。

3.1.3　“开始”(START)按钮

“开始”按钮的应用只需快速按下和弹开。“开始”按钮被用于：激活混匀阶段;混匀后重置加样;如设置为步进式加样,则“开始”按钮为激活分配动作;如设置为连续分配模式,则“开始”按钮为激活一个分配循环;在连续分配模式过程中,可用“开始”按钮进行暂停,在下一次按下“开始”按钮后继续加样动作。

3.1.4　吸头推卸杆

吸头推卸杆允许吸头被自动推卸。

3.1.5　ON/OFF开关(www.xing528.com)

开关可见于图2-29。在“OFF”位置时,加样枪处于非充电放置状态。

图2-29　ON/OFF开关状态

注意：加样器数日不用时只能放在“OFF”状态。在加样枪放回立式座之前,请确认开关处于“ON”的状态。

3.2　加样器充电

当加样枪置于立式充电座上时处于连续充电状态,可充至最大电量状态。这个充电器使用非接触系统,无须保养,没有敏感金属。磁性锁可保证加样器充电时处于正确位置上。

当加样器需要收藏较长时间时,电池电力低于操作要求电力。这时,显示器无显示,按键无反应。为了激活电池：

3.2.1　确认“开关”(ON/OFF)按钮处于“ON”的状态。

3.2.2　将加样器放回立式充电座上。一段时间后(时间长短取决于电池初始化情况),一个箭头以及字母“E”显示在显示屏上。

3.2.3　按“开始”(START)按钮,活塞回到初始位,加样枪已经处于准备工作状态。

注意：如果加样枪进行第一次充电,或者长时间未使用过,建议保证10h的连续充电。

3.3　加样枪编程

3.3.1　选择分配模式

当加样枪处于原始状态时,按“*”键选择分配模式。连续(CONTINUOUS)加样模式：“*”会显示出来;步进(STEP)加样模式：“*”不应显示。

3.3.2　选择接种模式

接种参数的选择是按照被接种试条的种类要求进行的：接种杯数(16或32)和每杯的分配量(55μL或135μL)。

当加样枪处于原始状态时,屏幕显示最后接种模式的设置参数。

按“M”：“▶”符号消失。再按一次“M”,直到需要的参数显示出来。按“E”确认所有选择,“▶”符号再次显示出来。

3.3.3　连续分配模式下接种速度(间隔时间)的设置

当加样枪在原始状态下,按“S”键两次：屏幕上显示出数字。其数值每按一次,连续分配模式的两次接种间隔时间增加0.1,其数值可由1变化到50,即0.1 s到5 s。可通过以下方法变更数值大小：按“SELECT UP”或“SELECT DOWN”键(每按一次数值改变一个单位)。按“E”键确认选择的数值。

3.4　接种试条

从立式座台取下加样枪;将无菌吸头紧紧地扣在加样枪鼻锥;将吸头伸入安培瓶底部。

3.4.1　混匀菌悬液

激活混匀过程：按“开始”(START)按钮。混匀分5个阶段：

吸液(保持吸头前端在安培瓶的底部)→放出(轻轻提高加样枪,使吸头前端在略高于页面水平轻贴住管壁,将瓶绕吸头旋转,保持吸头前端贴壁)→吸液→放出→吸液。

3.4.2　分配液体

当混匀阶段的最后一次吸液完成后：按“开始”(START)按钮,进入液体分配程序,将吸头从安培瓶中移出,并使其位于试条的第一个杯的上方。

3.4.2.1　“连续”(CONTINUOUS)分配模式

按“开始”(START)按钮。每分配完一个杯位,就将吸头移到下一个杯位上方。当接种完16个杯以后,加样枪停止。

如果是32个杯数：将吸头置于下一个杯,按“开始”(START)按钮,每分配完一个杯位,就将吸头移到下一个杯位上方。

请注意：在连续分配模式下可以用“开始”(START)按钮来暂停和重启。当接种完成后将吸头移回安培瓶,按“开始”(START)按钮两次：吸头内残余液体被清空,按压推卸杆：吸头从鼻锥处被卸除,将加样枪放回立式座台。

3.4.2.2　“步进”(STEP)分配模式：按“开始”(START)按钮,将吸头置于下一个杯,按“开始”(START)按钮：液体分配一次,将吸头置于下一个杯,直至所有杯都得到接种。

当接种完成后将吸头移回安培瓶,按“开始”(START)按钮两次：吸头内残余液体被清空,按压推卸杆：吸头从鼻锥处被卸除,将加样枪放回立式座台。

3.5　接种ID32试条

此时没有混匀阶段。除最后阶段有不同以外,其他接种步骤按3.4.2.1中所述的完成(连续分配模式和步进分配模式)。

如果需要同时进行其他试验时,按以下步骤从鉴定悬浮液中分配55μL到其他培养基。

当鉴定接种完成时(32次,55μL/次)：按“开始”按钮一次：55μL液体可以被分配到其他培养基内。

4.设备的维护

4.1　更换电池

打开和移除后盖顶端的两个用于固定的螺丝钉;打开和移除电池后盖;直接移除电池;安装新电池：将电池压住接触弹簧,在将电池顶端装入对应位置。

注意：正极向下。重新盖上后盖、上紧螺丝。注意：不要上得过紧。

4.2　操作限制/自动化

ATB电子加样枪可以完成连续接种20个试条。超过20个试条(最大不超过50个试条)时,在每完成一套鉴定-药敏试条接种后,须将加样枪放回立式充电座上。

4.3　清洗鼻锥

旋松鼻锥,并清洗。如有需要则进行消毒或蒸汽灭菌。鼻锥部的小孔应被清洁并保持通畅。

4.4　消毒

将鼻锥用1%消毒液浸泡至少1 h。用无菌蒸馏水小心漂洗,将消毒液完全清除干净,干燥。

4.5　维护

在将鼻锥旋回位置上以前,将原位置清洁,并轻轻涂上一层硅树脂。