色谱定量鉴定方法中的内标法优化

1.色谱峰面积法　在一定的色谱分离条件下，检测器的响应信号，即色谱图上的峰面积与进入检测器的质量（或浓度）成正比，这是色谱定量分析的基础。

新型的色谱仪器大多配备计算机，可自动采集数据、获得峰面积后进行数据处理及计算。

2.定量校正因子　色谱定量分析是基于被测物质的量与其峰面积成正比关系。但由于同一检测器对不同的物质具有不同的响应值，所以两个相等量的物质，其色谱峰面积往往不相等，这样就不能用峰面积来直接计算物质的含量。为了使检测器产生的响应信号能真实反映出物质的含量，就要对响应值进行校正，因此，引入“定量校正因子”参数。

试样中各组分质量mi与其色谱峰面积Ai成正比，即

式中：fi——绝对校正因子，表示单位面积对应的物质质量。

fi由仪器的灵敏度决定，它既不易准确测定，又无法直接应用。所以在定量工作中都采用相对校正因子，即某物质与一标准物质的绝对校正因子之比值。对热导池检测器常用的标准物是苯，氢火焰离子化检测器常用的标准物是正庚烷。

3.常用的几种定量方法

（1）归一化法　当试样中各组分都能流出色谱柱，并在色谱图上显示色谱峰时，可用此法进行定量计算。

假设试样中有n个组分，每个组分的质量分别为m1，m2，…，mn，各组分含量的总和m为100％，其中组分i的质量分数wi可按下式计算：

式中：fi——质量校正因子。

归一化法的优点是简便、准确，当操作条件如进样量、流速等变化时，对结果影响小。(www.xing528.com)

（2）内标法。当只需测定试样中某几个组分，而所有组分不能全部出峰时，可采用此法。

所谓内标法是将一定量的纯物质作为内标物，加入到准确称取的试样中，根据被测物和内标物的质量及其在色谱图上相应的峰面积，求出某组分的含量。例如，要测定试样中组分i（质量为mi）的质量分数wi，可在试样中加入质量为ms的内标物，试样质量为m，则

内标法的优点：当操作条件变化时，引起的误差将同时反映在内标物及待测组分上而得到抵消，因而结果更为准确。缺点是每次分析都要准确称取试样和内标物的质量，因此不宜作快速控制分析。

选取内标物应遵循的原则如下。

①内标物应是试样中不存在的物质。

②内标物加入的量应接近于被测组分。

③内标物的色谱峰应位于被测组分色谱峰附近，或几个被测组分色谱峰的中间，并与这些组分完全分离。

④内标物与被测组分在物理及化学性质上尽量接近，这样当操作条件变化时，更有利于内标物及被测组分做相同的变化。

（3）外标法。外标法是应用被测组分的纯物质来制作标准曲线。此时，被测组分的纯物质加稀释剂后配成不同质量分数的标准溶液，取固定量标准溶液进行分析，从所得色谱图上测出响应信号峰面积或峰高等，然后绘制响应信号（纵坐标）对质量分数（横坐标）的标准曲线。分析试样时，取和制作标准曲线时同样量的试样（固定量进样），测得该试样的响应信号，由标准曲线即可查出其质量分数。

此法操作简单，计算方便，但结果的准确度取决于进样量的重现性和操作条件的稳定性。