内蒙古河套酒厂科研所罗维、孙高翔、刘永婷、刘红瑜、白永平，应用曲霉菌淀粉酶透明环选育菌种的研究，取得一定的经验。
（一）材料与方法
1.材料
（1）UV-48 原菌来源：内蒙古轻工业研究所供。
（2）河内白曲原菌来源：内蒙古轻工业研究所供。
（3）延续传代的生产菌株：内蒙古河套酒厂微生物室分离。
（4）15%麸浸液察氏培养基、斜面制备：内蒙古河套酒厂微生物室。
（5）米曲斜面制备：内蒙古河套酒厂微生物室自制。
（6）对比菌株：青霉菌株，内蒙古河套酒厂微生物室分离。
2.方法将上述两菌株经多次复壮，单细胞分离传代。观察2～3d 之内15%察氏培养基表面，首先出现透明斑，菌丝团培养基之间透明环最大直径的菌株，分别移入上述两斜面，成熟后作为原菌备用。
3.透明环选育菌种的标准和要求
（1）选择单细胞分离之后，曲霉菌加速期所分泌酶在培养基表面水解淀粉，形成大直径无色透明斑。(www.xing528.com)
（2）挑选培养基表面48～58h 的菌丝团和培养基之间大直径无色透明环。
（3）观察培育48～72h 菌丝团表面，选出带黄色素和白色孢子稠密、健壮的初期菌落。按上述三点，选出的菌株移入察氏和米曲斜面，成熟后作为原菌备用。将每次选出的原菌，坚持定期进行单细胞分离和测定其性能，将具备优良性能的菌株，作为下次扩培的原菌种。这样代代相传可将生产菌种的良好功能延续下去。
16～72h 平皿内培养基表面透明斑、环、孢子。因无条件拍照，故以模拟图形式说明。观察分三步进行。
（二）结果
1.1993年7 月之后，微生物室应用UV-48 生长期所分泌淀粉酶水解淀粉的专一性能，出现无色透明环的方法，将10 次生产分离所得的原菌种经750次麸曲扩培后测定其糖化力说明：透明环直径加宽和糖化力上升是相关的。
2.1995年6 月后将河内白曲1 号原菌、两次单细胞分离选种，经麸曲150次扩培和糖化力测定说明，糖化力上升和透明环直径相关。
（三）分析讨论
河套酒厂微生物室，单细胞育种时发现含淀粉平皿培养基表面，丝团菌落周围有无色透明圈，根据碘和淀粉结合后形成蓝色碘淀粉的反应验证该透明环是淀粉—水解淀粉转为糖类形成的。多次在培养基丝团菌落周围，有边缘不规整明显透明斑，及在丝团菌落加速和对数期生长发育之间，透明斑中心相继出现点状丝团并逐渐发育成为初期丝团，丝团菌落与培养基之向定有透明环出现。根据曲霉菌生长初期即分泌淀粉酶向菌丝团菌落周围扩散的现象，两年多时间反复观察发现，菌丝团表面具有色素和白色孢子呈现，并有一定规律性：故将该规律性现象变化为选育淀粉酶菌种的根据—即标准。
淀粉酶是曲霉菌分泌的一种活性蛋白质，在750 次UV-48 和河内白曲150 次糖化力鉴定之中起到决定的专一作用。但酶活力也受环境变化的影响，有时也会出现一些不，规律的阶梯型上升现象，这和生长期水分、温湿度、pH、营养等条件一时失调有关。糖化力的直线上升是不存在的。
以透明斑、环为主的选种要点，制订判定标准，是准确、简易、快速的，作为选择生产原菌种的方法是可行的。两年多时间应用上述标准选种，使UV-48、河内白曲糖化力分别提高了1195/（mg·h）和345/（mg·h）。
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