在肉品生产过程中，常需采用一些快速方法来筛查不安全的原料肉。在宰前通过试剂盒快速检测牲畜尿液中违禁药品，能更好地避免不安全畜肉流向市场，且相比宰后抽检更加方便快捷。
【岗前准备】
猪尿样；
盐酸克伦特罗快速检测试剂盒、莱克多巴胺胶体金快速检测试剂盒；
一次性PE手套和塑料杯；洁净离心管、试管、烧杯、量筒（10mL）等。
【岗位操作】
1.尿液中盐酸克伦特罗的胶体金快速检测
盐酸克伦特罗（Clen）快速检测试纸卡（以康正生物公司产品为例）基于竞争法胶体金免疫层析技术，用于快速筛查盐酸克伦特罗超标的尿液，可用于动物屠宰前的筛查。将检测液加入试纸卡的样品孔，检测液中的Clen与金标垫上的金标抗体结合形成复合物，若Clen在检测液中浓度低于灵敏值，未结合的金标抗体流到T区时，被固定在膜上的Clen-BSA偶联物结合，逐渐凝集成一条可见的T线；若Clen浓度高于灵敏度值，金标抗体全部形成复合物，不会再与T线处Clen-BSA偶联物结合形成可见T线。未固定的复合物流过T区被C区的二抗捕获并形成可见的C线。C线出现则表明免疫层析发生，即试纸有效。
①试样：猪尿样约10mL。
②前处理：用干燥、洁净的离心管或适当容器采集10mL猪尿样，直接加样检测。若尿样出现沉淀或混浊物，则离心后再检测。
③器材：盐酸克伦特罗（瘦肉精）胶体金检测试纸卡（尿样，康正生物或其它同类型产品公司出品）等（参见原料肉安全（宰前）快速检验任务三岗前准备）。
④操作：从包装盒内取出试纸卡，打开后在较短时间内（1h）使用。用滴管吸取待检样品溶液，滴加3滴于加样孔中，加样后开始计时。5min后判读，10min之后的结果无效。
⑤结果判定：
阴性：C线显色，T线肉眼可见，无论颜色深浅均判为阴性。
阳性：C线显色，T线不显色，判为阳性。
无效：C线不显色，无论T线是否显色，该试纸判为无效。
图1-17为显色效果示意图。
⑥注意事项：试纸卡拆开即用，勿长时间暴露于空气中，避免储存于温度较高的环境中，忌冷冻。自来水、有机溶剂、蒸馏水或去离子水均不能作为阴性对照。本方法适用于快速筛查。
图1-17 盐酸克伦特罗
（瘦肉精）胶体金检测试纸卡（尿样）结果示意图(www.xing528.com)
（康正生物公司产品说明书）
2.莱克多巴胺胶体金快速检测
莱克多巴胺胶体金快速检测试纸卡（以康正生物公司产品为例）应用竞争抑制胶体金免疫层析的原理，将莱克多巴胺抗原先固定于硝酸纤维素膜的测试区中（T线），猪尿中莱克多巴胺（竞争抗原）与金标垫上的胶体金标记抗体结合后，根据迁移到测试区的剩余抗体能被T线捕获的多少，来定性判定待测猪尿中莱克多巴胺的含量。
①试样：新鲜尿样或在4℃保存不超过24h的尿液。
②前处理：新鲜采集的尿液可直接检测。若尿液不立即检测，须在4℃保存，且不超过24h。若尿样在储存过程中出现沉淀或浑浊，须离心后取上清检测。
③器材：莱克多巴胺胶体金检测试纸卡（尿样，康正生物或其它同类型产品公司出品）等（参见原料肉安全（宰前）快速检验任务三岗前准备）。
④操作：从包装盒内取出试纸卡，加样孔、测试区朝上平放在桌面。打开后在较短时间内（1h）使用。用滴管吸取待检尿液，滴加3滴于加样孔中，加样后开始计时并观察测试区窗口中T线和C线的显色反应，C线应显紫红色。5分钟后判读，10分钟之后的结果无效。
⑤结果判定：
阴性：C线显色，T线肉眼可见，无论颜色深浅均判为阴性。
阳性：C线显色，T线不显色，或者T线隐隐约约，判为阳性。
无效：C线不显色，无论T线是否显色，该试纸判为无效。
⑥注意事项：试纸卡拆开即用，勿长时间暴露于空气中，避免储存于温度较高的环境中，忌冷冻。自来水、有机溶剂、蒸馏水或去离子水均不能作为阴性对照。本方法适用于快速筛查，若要确证还需其他方法进行验证。如滴加检测液后30s内，在测试窗口无液体移行，则再补加1滴检测液。
图1-18 莱克多巴胺胶体金检测试纸卡
（尿样）结果示意图
（图片源于康正生物公司产品说明书）
【问题探究】
快速检测试剂盒法应用的意义是什么？
由于动物饮食了β-受体激动素（莱克多巴胺、克伦特罗等）后会增加瘦肉率，常有不法养殖场违规添加。为了能快速检出β-受体激动素，在屠宰前检测动物的尿液是最为方便、快速的筛查方法。《GB/T 22286—2008动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法》对于肉样需要均质，酶解后以高氯酸调节pH，沉淀蛋白离心后，上清液用有机溶剂提取，再经阳离子交换柱净化后，通过液质联用仪器内标法定量。但是我们可以看出，液质联用法耗时，同时对设备要求高，不利于大生产中的在线快速筛查，所以借助试剂盒方法能大大提高原料肉生产时的效率。
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