快速检测农药残留的方法与步骤

任务引入案例

农药残留超标频现

原国家食品药品监督管理总局官网陆续发布《总局关于12批次食品不合格情况的通告》（2017年第205号）、（2017年第210号）及（2017年第221号）。其中，广州市白云区广州江南果菜批发市场的六个农残超标批次分别为：鲜菜区127档销售的韭菜，腐霉利检出值为0.86mg/kg，比国家标准规定高出3.3倍；鲜菜区337档销售的茄子，涕灭威检出值为0.267mg/kg，比国家标准规定高出7.9倍；鲜菜区531档销售的韭菜，克百威检出值为0.210mg/kg，比国家标准规定高出9.5倍；鲜菜区219档销售的菠菜，毒死蜱检出值为0.18mg/kg，比国家标准规定高出80.0%；鲜菜3区310档销售的上海青（普通白菜），毒死蜱检出值为0.52mg/kg，比国家标准规定高出4.2倍；而超标最严重为鲜菜区317档销售的芹菜，毒死蜱检出值为1.8mg/kg，比国家标准规定高出35.0倍。

记者从广东省食品药品监督管理局官网，以及白云区食品药品监督管理局所发布的最新监管动态看到，针对国家食药监总局的“205号”和“210号”通告，已有相应的处置情况通告及风险控制情况通告，而“221号”暂未发布处置情况。据白云区食药监局回复，其已将三份核查情况交给广东省食药监局。收到不合格检验报告后，白云区食药监局要求经营者依法提供进货查验资料，以及追溯生产源头，开展风险控制工作。据悉，白云区食药监局已经对广州江南果菜批发市场经营管理有限公司涉事的6个档口送达了不合格报告并进行了现场检查。经查，因涉事经营者皆履行了食用农产品进货查验等义务，有充分证据证明其对所采购的食用农产品不符合食品安全标准不知情，并能如实说明其进货来源，因此按照规定对经营者免予处罚。白云区食药监局也分别向天津市武清区市场和质量监督管理局、都匀市市场监督管理局、昆明市呈贡区食品药品监督管理局等发去了关于协查农残超标蔬菜相关情况的函。

任务介绍

目前，我国农药平均利用率仅为35%，大部分农药通过径流、渗漏、飘移等流失，污染土壤、水环境，影响农田生态环境安全。由于农药使用量较大，加之施药方法不够科学，带来生产成本增加、农药残留超标、作物药害、环境污染等问题。为了有效控制农药使用量，原农业部制定并发布《到2020年农药使用量零增长行动方案》。《到2020年农药使用量零增长行动方案》披露，据统计，2012年至2014年，我国农作物病虫害防治农药年均使用量31.1万吨。提出力争到2020年实现农药使用量零增长，提高农产品质量，为餐桌上的安全提供源头保障。

“十三五”国家食品安全规划指出“食品安全抽样检验覆盖所有食品类别、品种，突出对食品中农药兽药残留的抽检”，“市、县级食品安全监管部门要全面掌握本地农药兽药使用品种、数量，特别是各类食用农产品种植、养殖过程中农药兽药使用情况，制定的年度抽检计划和按月实施的抽检样本数量要能够覆盖全部当地生产销售的蔬菜、水果、畜禽肉、鲜蛋和水产品，每个品种抽样不少于20个，抽样检验结果及时向社会公开，将食品安全抽检情况列为食品安全工作考核的重点内容”，“食品安全抽检覆盖全部食品类别、品种。国家统一安排计划、各地区各有关部门分别组织实施的食品检验量达到每年4份/千人。其中，各省（区、市）组织的主要针对农药兽药残留的食品检验量不低于每年2份/千人。”

我国的农业生产大都是小规模的农户分散生产，量小面大，不好监管，农产品中的农药残留仍较为严重。研究农药残留的快速检测技术，在水果蔬菜上市之前对其农药残留进行大量的快速抽检，并制定推广、施行市场准入机制，是我国现阶段控制农药残留的一种有效方法。这不仅关系到人民群众的身体健康，而且对增加农产品出口、提高农民收入以及农业的可持续发展都有着极其重要的意义。用于农药残留速测仪的主要技术有酶抑制率法、免疫层析法等。

1. 酶抑制率法

酶抑制分光光度法大多是根据乙酰胆碱酯酶催化底物乙酰胆碱水解生成乙酸和胆碱，其水解产物与显色剂反应生成黄色物质，在410nm 处有最大光吸收，而有机磷和氨基甲酸酯类农药抑制乙酰胆碱酯酶活性，通过测定在410nm 处的吸光度随时间的变化值来计算抑制率，从而判定样品中的有机磷和氨基甲酸酯类农药是否超标。酶抑制分光光度法具有快速、灵敏、操作简便、技术成熟、成本低等优点，已成为对果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留现场快速初筛的主流技术之一，可在基层检测机构、大型批发市场、农贸市场等对上市前的果蔬进行检测，对果蔬的农药残留超标源头起到监测作用。

酶抑制速测卡法是基于胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯（红色）水解为乙酸和靛酚（蓝色），有机磷和氨基甲酸酯农药对胆碱酯酶有抑制作用，使胆碱酯酶与底物的催化显色过程发生变化，根据显色不同来判定样品中有机磷或氨基甲酸酯类农药残留情况。速测卡法可以利用体温加热药片，肉眼直接观察颜色变化，也可以配套农残速测仪使用。速测卡可配套如图4-6所示的便携式农药残留速测仪使用，此仪器具有加热、恒温和定时功能，可对速测卡进行加热至40℃，仪器可同时检测12个样品。样品测试卡与空白对照卡比较，白色药片不变色或略有淡蓝色均为阳性结果，不变蓝为强阳性结果，说明农药残留高，显浅蓝色为弱阳性结果，说明农药残留量相对较低。白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同，为阴性结果，如图4-7所示。

图4-6 便携式农药残留速测仪外观及结构示意图

图4-7 农药残留速测卡

图4-8所示的L7-7000农药残留快速测试仪采用分光光度检测、干式农残检测两个方法，与数字化管理模块、无线通信模块于一体。分光光度检测模块检测是根据待测物中的有害物质分子对可见光的选择性吸收和朗伯-比尔（Lambert-Beer）定律，用未知浓度样品与已知浓度标准物质比较的方法进行定性鉴别或者定量分析的检测，能对有机磷和氨基甲酸酯类农药残留（国标）、农药残留（农标）、农药残留（菊酯类）等相应农药残留类进行检测。干式农残检测模块根据国家标准（GB/T 5009.199—2003）对有机磷和氨基甲酸酯类农药残留进行快筛检测（检测时间8min），用于蔬菜、粮食、瓜果、茶叶、桑叶、烟叶等食品中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的检测，其测试原理是仪器智能化读取农残检测卡片颜色状态，来判断样品中含有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留情况。

图4-8 LZ-7000农药残留快速测试仪

2. 胶体金免疫层析技术

免疫分析法是一种基于抗原抗体特异性识别和结合反应的分析方法。它集测定的高灵敏度和抗性反应的强特异性于一体，在某些重要生物活性物质的痕量检测方面取得了很大成就。农药残留检测中最常用的为胶体金免疫层析技术，该技术开发的产品，具有特异性强、灵敏度高、分析容量大、方便快捷、成本低廉等优点，只需要简单的仪器设备，可广泛应用于现场样品和大量样品的快速检测。目前在杀虫剂、杀菌剂、除草剂等方面均有快检产品。但该方法的开发过程需要投入较多资金、较长时间，且抗体制备难度较大，抗体有特异性，只适用于单一农药残留量的快速检测分析。

任务实操

数字农药残留速测卡法测果蔬中有机磷和氨基甲酸酯——配套LZ-7000农药残留快速测试仪

1. 方法原理(www.xing528.com)

数字农药残留速测卡是国内首创将胆碱酯酶法和侧向层析技术相结合的产品，综合了传统农药速测卡和酶试剂法的优点，弥补了两者的缺陷，灵敏度高，检测时间短，符合国标GB/T 5009.199—2003《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》。

2. 适用范围

蔬菜、瓜果、茶叶、桑叶、烟叶、粮食等食用农产品中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测。

3. 样品处理

（1）缓冲液配制 取一包缓冲剂，加入500mL纯净水溶解，常温存放。

（2）样品处理 选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm²左右见方碎片，取5g放入带盖瓶中，加入10mL缓冲液，振荡50次，静置2min以上。上清液为待测液。

4. 检测步骤

（1）提前将LZ-7000开机预热15min；在快速检测界面点击【干式农残】检测模块，进入干式农残检测界面。

（2）对照测试 从干燥筒中取出速测卡，将速测卡插入卡槽中，选择检测通道所检测的样品名称，选择相应的被检单位，用移液器吸取80μL 缓冲液缓慢滴加于加样区（箭头指示方向上），点击相应孔道液晶屏上的【对照】。

（3）样品测试 从干燥筒中取出速测卡，将速测卡插入卡槽中，用移液器吸取80μL待测液缓慢滴加于加样孔上，点击【样品】，仪器开始倒数计时，8min 后计时完毕，显示相应检测结果。

5.结果判定（参照GB/T 5009.199—2003）

结果以酶抑制程度（抑制率）表示。当样品抑制率≥50%时，表示蔬菜中有高剂量有机磷和氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。当样品抑制率＜50%时为阴性结果。

6. 注意事项

（1）速测卡请在保质期内使用，不可以重复使用；

（2）使用前将速测卡和待测样本恢复至常温；速测卡在开封时若发现干燥筒干燥剂乙腈变色，密封不好，则不可再用；

（3）本速测卡为农药残留快速筛选产品，任何可疑及阳性结果请用其他方法进一步确认。

任务拓展

菊酯类农药速测试剂——配套LZ-7000农药残留快速测试仪。

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