任务引入案例
最早关于赭曲霉毒素A的记录是在1928年的丹麦。在1957年和1958年，多瑙河沿岸国家原南斯拉夫、罗马尼亚和保加利亚等国的居民流行一种肾病（巴尔干肾病），农村地区从事种植业的农民，只食用自己田里收获的粮食。该肾病就是由于人食用了含有赭曲霉毒素的食物引起，人类食物和动物饲料中都有赭曲霉毒素存在，赭曲霉毒素就是造成人类和猪发生肾病的原因。国际癌症研究机构（IARC）将赭曲霉毒素A分类为可能的致癌物。
任务介绍
赭曲霉毒素主要包括赭曲霉毒素A、赭曲霉毒素B、赭曲霉毒素C 等结构相类似的化合物，其中赭曲霉毒素A 分布最广泛且毒性也最大，而且在农作物中污染程度最高。经研究发现其热稳定性强，通过烘焙、蒸煮等加工过程处理后只能破坏一部分，总含量仅降低20%。
赭曲霉毒素A 普遍存在于谷物及制品、牛乳、咖啡、香料、酒类和中草药及其制剂中，可导致人类及动物体内毒素的蓄积。赭曲霉毒素A 具有很强的肝脏毒性和肾脏毒性，并会使动物致畸、致突变和致癌。在已发现的真菌毒素家族中，根据其重要性及危害性排序，被认为是仅次于黄曲霉毒素而列第2位。
赭曲霉毒素A 一般是用薄层色谱、高效液相色谱法检测，但因其操作繁杂、费用昂贵而影响实际使用，使用荧光定量快速检测法能快速准确分析样品中赭曲霉毒素残留。
任务实操
小麦中赭曲霉毒素A荧光定量快速检测
1. 适用范围
适用于中草药、谷物及制品、牛乳、咖啡等样品中的赭曲霉毒素A的检测。
2. 方法原理
本实验主要利用赭曲霉毒素A 特异性核酸适体，及荧光染料对双链核酸的特异性结合原理，建立的一种检测赭曲霉毒素A 的快速定量方法。荧光染料不结合单链核苷酸，仅识别并结合双链DNA 的螺旋结构，继而释放荧光。当荧光染料浓度一定时，反应体系中加入不同浓度的赭曲霉毒素A，则反应液中的荧光强度不同，从而达到快速定量检测的目的。(www.xing528.com)
3. 操作方法
将小麦粉碎后过20目筛，在65℃下烘干后充分混匀，准确称取5.0g 待测样品于50mL离心管中，加入25mL 70%甲醇溶液。振荡提取5～7min，静置3min，过滤或离心得上清液。取600μL 室温下的样品稀释液与100μL 上清液涡旋混合，即为待测溶液。
提前将未开封的检测卡及待检样本放在室温下平衡0.5h左右。将检测卡平放，用移液器定量吸取100μL待测液加入600μL 样本稀释液中，反复吸打至5次，使其充分混合均匀，再吸取100μL此混合液垂直滴加于荧光定量检测卡的加样孔中，开始计时；反应10min后，将检测卡放入时间分辨荧光免疫层析检测仪中，点击仪器主界面“测量”菜单中“样品及时测量”按钮，进行检测。仪器读数完成后会自动计算出被检样本中的赭曲霉毒素A含量。
4. 结果判断与计数
采用便携式赭曲霉毒素A检测仪进行读数，打印检测报告。
5. 注意事项
注意使用一次性吸头，防止交叉污染。
任务拓展
部分国家、地区和组织对赭曲霉毒素A的限量标准。
拓展
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