快速检测非法添加壮阳类药物的保健食品

任务引入案例

原国家食品药品监督管理总局关于51家保健酒、配制酒企业69种产品违法添加行为的通告

原国家食品药品监督管理总局组织各省食品药品监管部门执法检查中发现，部分保健酒、配制酒生产企业存在违法添加行为。

初步查明，共有51家企业在69种保健酒、配制酒中违法添加了西地那非（俗称“伟哥”的药品成分）等化学物质，并在产品名称、标识、标签上明示或暗示壮阳、性保健等功能。其中，违法添加西地那非的有15家企业27种产品；违法添加他达拉非、硫代艾地那非、伐地那非、红地那非等（均为与西地那非类似的化学物质）的有5家企业7种产品；正在调查的涉嫌违法添加西地那非的产品27种，涉及标称企业25家；正在调查的涉嫌违法添加他达拉非、硫代艾地那非、伐地那非、红地那非等化学物质的产品8种，涉及标称企业7家。

任务介绍

近年来，人们对自身的保健越来越重视，市场上标示各种功能的保健食品越来越多。保健食品具有特定保健功能，适宜于特定人群食用，具有调节机体功能，不以治疗疾病为目的，并且对人体不产生任何急性、亚急性或者慢性危害的食品。然而在巨大的利益驱使下，某些不法分子、不法厂商未经过严格试验验证，擅自在一些保健食品中添加入国家明文规定不得在保健食品中添加的化学物质。

其中保健食品非法添加补肾壮阳类药物的行为尤为常见。2014年9月26日，国家食品药品监督管理总局已经发布提示，中国允许注册申请的特定保健食品不包括补肾壮阳、活血通络等功能，声称“能壮阳”的保健食品一律属于假冒保健食品。

此外，在标示具有抗疲劳功能的保健食品中也可能非法添加壮阳类化学药物，主要有两大类，一类是环磷酸鸟苷（cGMP）特异性磷酸二酯酶5（PDE5）型抑制剂，它是一种治疗男性性功能障碍（ED）的药物，代表性药物主要有枸橼酸西地那非（品牌名为艾可，俗称伟哥）、他达拉非（品牌名为西力士）、伐地那非（品牌名为艾力达）、爱地那非、硫代艾地那非等；另一类是蛋白同化制剂，是合成代谢类药物，具有促进蛋白质合成和减少氨基酸分解的特征，可促进肌肉增生，提高动作力度和增强男性的性特征，代表性药物主要有甲睾酮、司坦唑醇、达那唑等。这些药物在应对其适应症时，可以给予患者较为满意的疗效，但是，当患者在不知情的情况下将含有这些成分的保健品作为日常保健食品服用时，药物在患者体内不断积累，极其容易引起严重药物不良反应，甚至引起死亡。

原国家食品药品监督管理局曾颁布了一个针对补肾壮阳类中成药中非法添加西药的《药品检验补充方法和检验项目批准件》（批准件编号2009030），适用于补肾壮阳类中成药及抗疲劳类、免疫调节类保健食品中测定非法添加那红地那非等11种PDE5型抑制剂及其衍生物，初筛方法包括传统的物理化学鉴别和TLC 定性鉴别；确证方法包括HPLC的初步确证和液相色谱-质谱（LC-MS）联用技术的最终确证。随着快速检测手段的不断更新和发展，建立高灵敏度、高准确度、高通量和低成本检测非法添加壮阳类化学药物的方法，更适合于条件有限的基层药品监督管理部门日常的监督检验工作，以便于扩大对保健食品非法添加行为的发现范围，增强对保健食品的监管能力。

任务实操

实操一 西地那非的快速检测

西地那非是男性勃起障碍治疗药物，是属于PDE5型（磷酸二酯酶5型）抑制剂的处方药。当服用较大剂量的西地那非时会引起头痛、消化不良、头晕、皮疹等不良反应，更为严重的是，西地那非能增强硝酸酯类药物的降压能力，与任何一种短效或长效的硝酸酯类药物同时使用时，可能会引起致命性低血压反应，甚至导致突然死亡，因此国家严禁在任何保健品中添加，只能作为处方药使用。但一些保健品生产企业为突出产品的功效，置消费者健康于不顾，擅自在抗疲劳保健品、性保健品等非法添加。

方法一 胶体金免疫层析法

1. 适用范围

适用于西地那非类药物及其衍生物的快速鉴别，可检测胶囊剂、片剂、丸剂和散剂等剂型保健食品。

2. 检测原理

检测原理见模块二项目四中“辣椒制品中非法添加罗丹明B 快速检测（胶体金免疫层析法）”。

3. 检测试剂和器具

试剂：样品处理液，样品稀释液。

器具：西地那非胶体金快速检测试纸，2mL离心管，小吸管，称量纸。

4. 检测步骤

（1）不同剂型取样

①硬胶囊：旋开胶囊壳，取约1 /2粒内容物，置于5mL样品处理液瓶内。

②软胶囊：用剪刀剪开胶囊壳，挤出约1 /2粒内容物，置于样品处理液瓶内。

③丸剂、散剂等：取每次服用量的1 /8左右，尽量压碎或剪碎，置于5mL 样品处理液瓶内。

（2）样品前处理 拧紧样品处理液瓶盖，大力振摇约1min（丸剂大力振摇2min），静置约30s待药渣沉淀；用小吸管滴加7滴上清液至2mL离心管，加样品稀释液至1mL处，振摇混匀后，待测。

（3）样品检测 将试纸（不要打开铝箔袋）及待测的样本恢复至室温（20～30℃）；从原包装中取出试纸，将试纸平放于实验台面上；取小吸管吸取被测溶液3滴滴于试纸的S 孔内；5～10min内观察并记录实验结果。

5. 结果判定

阴性：试纸条在检测线（T）和质控对照线（C）处出现两条紫红色条带。阴性结果表明被测样品中未检测出西地那非及其衍生物。

阳性：试纸条只在质控对照线（C）处出现一条紫红色条带。阳性结果表明被测样品中检测出西地那非及其衍生物。

无效：质控对照线未出现紫红色条带，表明不正确操作过程或试纸失效。在此情况下应再次仔细阅读试剂盒说明书，并使用新的试纸条重新检测。如仍存在问题，应立即停止使用该批号产品，并与当地供货商联系。

6. 注意事项

（1）本方法仅用于西地那非及其衍生物的快速筛查；对于测定结果为阳性的样品，应送样至实验室或有资质检测机构进行精确定量。

（2）大量标本进行测试时，需做好标记，以免混淆。

（3）本试纸条仅用于一次性测试，同一试纸条不得重复使用。

（4）检测环境应避风，避免在过高温度、过高湿度或过于干燥的环境中进行测试。

（5）试剂和检测试纸条切忌冷冻或在已过有效期后使用。

方法二 仪器法

1. 适用范围

适用于胶囊剂、片剂、颗粒剂、袋泡茶等剂型的中成药、保健食品和食品中非法添加西地那非的快速半定量测定。

2. 检测试剂、器具和仪器

试剂：试剂A，试剂B。

器具：15mL离心管，2mL离心管，称量纸。

仪器：DY-3500食品综合分析仪（广东达元绿洲食品安全科技股份有限公司）。

3. 样品检测

（1）样品前处理 称取0.1g 样品（片剂需充分研碎；胶囊剂直接取内容物）至15mL离心管中，加入10mL 纯净水，盖上盖子，振荡1min，充分混匀，静置3min；取上清液0.2mL加入0.8mL纯净水，混匀，作为样品待测液。

（2）样品检测

对照测试：取一个2mL离心管，加入1mL纯净水；加入0.5mL 试剂A，再加入0.5mL试剂B，混匀。所得溶液上机进行对照测试。

样品测试：取一个2mL 离心管，加入1mL 样品待测液；加入0.5mL 试剂A，再加入0.5mL试剂B，混匀。所得溶液上机进行样品测试。

4. 结果计算

样品中西地那非的含量（mg/kg）=仪器所示的浓度值×500

本方法检出限：25mg/kg。

5. 注意事项

（1）本方法为半定量粗筛方法；对于测定结果为阳性的样品，应送样至实验室或有资质的检测机构进行精确定量。

（2）试剂B具有一定的腐蚀性，需佩戴手套，小心操作。

（3）15mL离心管洗净后可重复使用。

实操二 那非类药物的快速检测

1. 适用范围

适用于药品、保健食品中非法添加那非类（西地那非、豪莫西地那非、羟基豪莫西地那非、红地那非、那红地那非、艾地那非等）的快速检测。

2. 检测原理

那非类化合物经稀酸提取、氧化除杂后，生成黄色有机盐沉淀物。

3. 检测试剂和器具

试剂：试剂A，试剂B，试剂C。

器具：称量纸，注射器，过滤器，反应管，0.5mL一次性吸管。

4. 检测步骤

（1）不同剂型取样

①颗粒、片剂、丸剂：压碎成粉末称取0.3g于试剂A瓶中。(www.xing528.com)

②硬胶囊：旋开胶囊壳，称取0.3g内容物于试剂A瓶中。

③软胶囊：用剪刀剪开胶囊壳，挤出后称取0.3g内容物于试剂A瓶中。

④混合溶液类（包括口服液、营养保健酒等）:取0.3mL于试剂A瓶中。

（2）样品前处理 拧紧试剂A 瓶瓶盖，充分震荡混匀1min，静置2～3min 使上层溶液澄清；拔下注射器活塞及针头，换上过滤器，用0.5mL 一次性吸管取样本上清液轻轻倒入针筒内，装入活塞挤压，收集滤液约1mL 至反应管中；向反应管中逐滴滴加试剂B（边加变摇），至紫红色在15s内不褪色。

（3）样品检测 用0.5mL一次性吸管吸取试剂C，滴加3～4滴于待测液中，观察结果（此时勿振摇反应管）。

5. 结果判定

3min内，若上层出现黄色沉淀（或者浑浊），则可判定检测样品中含有那非类物质，为阳性（+）；否则判为阴性（-）。样品中那非类药物检出限为1.5g/kg。

6. 注意事项

（1）本方法仅供定性筛查用；对于测定结果为阳性的样品，应送样至实验室或有资质检测机构进行精确定量。

（2）不同样本所需加入试剂B 的量不同，需注意严格控制紫红色在15s 内不褪色。

（3）试剂有腐蚀性或毒性，避免与皮肤接触，如误入眼中，请立即用大量清水冲洗。

实操三 拉非类药物的快速检测

拉非类是PDE-5抑制剂中的一种，而PDE-5抑制剂是目前治疗男性性功能勃起障碍最有效的化学药品，长期使用会使人产生依赖，形成永久性阳痿。国家严禁在任何保健品中添加，但一些保健品生产企业为突出产品的功效，置消费者健康于不顾，擅自在缓解体力疲劳保健食品、性保健品等非法添加。

方法一 试剂盒法

1. 适用范围

快速筛查药品、保健食品中非法添加的拉非类（他达拉非、氨基他达拉非）。

2. 检测原理

拉非类化合物经乙醇提取后，与硫酸发生特征化学反应生成紫色物质。

3. 检测试剂和器具

试剂：试剂A，试剂B。

器具：0.5mL一次性吸管，称量纸。

4. 检测步骤

（1）样品准备

①固体类：胶囊剂约取1 /2粒内容物；片剂1片压碎成粉状；丸剂、散剂等取每次服用量的1 /4，压碎成粉状。取一支A试剂，将所取样品加入管中，盖紧盖子大力振摇1～2min，静置2～3min，至上层溶液澄清。

②液体类：无需前处理，直接取样加入 A 试剂中，拧紧瓶盖充分振荡混匀1min，静置2～3min使上层溶液澄清，待测。

（2）样品检测 用0.5mL一次性吸管吸取上清液，加入5滴于试剂B 中，盖上瓶盖摇匀，静置观察。

5. 结果判定

5min内，若试剂B 瓶中的溶液不变色，则判为阴性（-）；若出现紫色，则可判定样品中含有拉非类物质即为阳性（+）；若滴加样本溶液至试剂B 瓶后，背景颜色为淡黄色，3min 内颜色加深，也判为阳性（+）。对照品检出限0.05mg/mL，胶囊剂样品检出限为2.6mg/g，片剂样品检出限为1.0mg/g。

6. 注意事项

（1）本方法仅为定性筛查用。对于测定结果为阳性的样品，应送样至实验室或有资质检测机构进行精确定量。

（2）若检测后颜色不好判断时，建议用试剂B 液作对比，垫于白纸上进行观察判断。

（3）试剂有腐蚀性或毒性，避免与皮肤接触，如误入眼中，请立即用大量清水冲洗。

方法二 仪器法

1. 适用范围

适用于胶囊剂、片剂、颗粒剂、袋泡茶等各种剂型的宣称具有壮阳效果的中成药、保健食品和食品中非法添加拉非类药物的快速半定量测定。

2. 检测原理

检测原理同试剂盒法。经仪器可进行半定量测定。

3. 检测试剂、器具和仪器

试剂：试剂A，试剂B。

器具：2mL离心管，称量纸。

仪器：DY-3500食品综合分析仪（广东达元绿洲食品安全科技股份有限公司）。

4. 检测步骤

（1）样品前处理

液体样品：取200μL样品于2mL离心管中，加入1.8mL 试剂A，混匀，作为样品待测液。

固体样品（片剂、胶囊剂、茶剂）:称取0.2g样品（片剂需充分研碎；胶囊剂直接取内容物），加入5mL 试剂 A，盖上盖子，振荡1min，充分混匀，静置3min；取上清液100μL加1.9mL试剂A，混匀，作为样品待测液。

（2）样品检测

对照测定：取一个2mL 离心管，加入1.8mL 纯净水；加入200μL 样品待测液，混匀后于40℃水浴反应10min，然后上机进行对照测定。

样品测定：取一个2mL离心管，加入1.8mL试剂B；加入200μL样品待测液，混匀后于40℃水浴反应10min，然后上机进行样品测定。

5. 结果计算

液体样品结果：样品中拉非的含量（mg/L）=仪器所示的浓度值×10。

固体样品结果：样品中拉非的含量（mg/kg）=仪器所示的浓度值×500。

6. 注意事项

（1）本方法为半定量筛查方法；对于测定结果为阳性的样品，应送样至实验室或有资质的检测机构进行精确定量。

（2）试剂B具有一定的腐蚀性，需佩戴手套，小心操作。

任务拓展

拓展一 保健食品中可能非法添加的补肾壮阳类药物。

拓展二 选购保健食品的“四明确”和“四看清”。

拓展一～拓展二

复习思考题

1. 什么是保健食品？保健食品应符合哪几方面的要求？

2. 保健食品与普通食品、药品的区别有哪些？

3. 简述我国保健食品中违禁药物添加特点。

4. 举例说明保健食品中添加违禁药物的危害。

5. 简述快速检测技术应用于保健食品中违禁药物检测的优势。

6. 查阅资料，阐述我国保健食品检测技术现状。