（一）用具与药品
滑动切片机、生物显微镜、尖头镊子、单面刀片、双面刀片、载玻片、盖玻片、小烧杯、解剖针、解剖剪、培养皿、毛笔、酒精灯、吸水纸、FAA固定液、各级乙醇、0.01 g/mL番红染色液、0.05 g/mL固绿染色液、二甲苯、中性树胶等。
（二）材料
（三）操作步骤
（1）选择材料 选择粗细一致、直而不弯、形态整齐、软硬一致、无腐败现象的材料。如果是进行木材切片，应选边材而不用心材。材料长度以2～3 cm为宜。
（2）抽除空气。
（3）软化处理。
（4）切片 厚度一般为10～20 μm。
（5）固定 切下的切片，可先浸于清水中，待切片完毕后，将切片移入FAA固定液或其他固定液中。有时为节省时间，可直接移入70%～95%乙醇中固定。如需暂时保存，可放入70%乙醇中。
（6）染色 用番红染色12～24 h。
（7）脱水 用50%乙醇冲洗，至纤维素壁的红色变淡而木质部细胞呈深粉红色为止，再经70%乙醇、85%乙醇脱水各1 min。
（8）复染 用固绿复染1 min。
（9）继续脱水 经95%乙醇浸泡1 min，以洗去多余固绿，再经100%乙醇Ⅰ和100%乙醇Ⅱ脱水，各5 min。
图3-7 夹竹桃茎横切
图3-8 松树茎横切
（10）透明 分别浸入50%二甲苯、100%二甲苯Ⅰ、100%二甲苯Ⅱ中，各10 min。
（11）封藏 用中性树胶封片。
染色结果：木质化壁红色，纤维素壁绿色（图3-7，图3-8）
附：坚硬材料切片前的软化过程，一般要经过抽除空气和软化处理两个阶段。
（1）抽除空气
少数材料密度较大，放入溶液中易下沉。大多数材料密度小而浮在液面上，会使各种处理不彻底。因此必须设法排除空气使材料下沉。通常有两种方法。
① 冷热法 这种方法多适用于制作木材切片，制作时抽除空气兼有软化作用。将木材切成小块，放入水中煮沸约半小时，取出，立即投入冷水中浸约半小时，再放入沸水中煮约半小时后再立即投入冷水中，如此反复多次，一般便可将材料中的空气排除，使材料下沉。(www.xing528.com)
② 抽气法 如为较大木块可用抽气机抽气，至材料中无气泡排出为止。如果是一般枝条，用抽气机可能会出现组织变形，可改用10 mL注射器，进行材料内空气的抽除。其方法是，将材料放入注射器内，并将内筒套入，然后吸入液体，使之浸没材料。然后用左手的食指堵住注射器小孔，用右手向外拉注射器内筒，使之减压，空气便可随之排出。
（2）木材的软化方法
①甘油乙醇软化法
甘油乙醇软化液（纯甘油和50%乙醇等体积混合），适用于新鲜材料或采下一段时间但尚未干燥的材料。将材料抽气后，切成小块，浸入该液中一段时间后取出，用徒手切片法试切。如果仍然切片困难，则回原液中继续软化，直至适于切片为止。它不仅能使木材变软，而且又不致木材变脆。它之所以能起软化作用是因为甘油能溶解材料中的碳酸钙和钙化物等硬物质。它可作长期软化之用，但浸渍过久的材料染色困难。
②氢氟酸软化法
此法适用于已经干燥或质地较硬的木材。如用甘油乙醇长时间处理也不能软化的木材，用该法处理可使之软化，步骤如下：
A. 抽气处理 将木材切成小块，用冷热法或抽气法除去空气。
B. 氢氟酸软化处理 将上述抽气处理的木材浸入氢氟酸水溶液中，其常用浓度多为100%，也有人用30% ～ 40%的水溶液，这主要是根据木材硬度而定。处理时间一般1～2周，总之以软化为准，但时间不能过长，否则会损伤材料。特别坚硬的木材则需软化数月才能切片。
C. 用甘油乙醇进一步处理 材料经氢氟酸处理后取出，用流水冲洗2～4 h后用刀片试切。如易切片可进行下一步工作，如不易切片，可仍旧入氢氟酸液中处理。已经能切片的材料，应水冲洗2 d以上，再将材料放入甘油乙醇混合液中处理1～2月之后，即可切片。
③醋酸纤维素软化法
极硬的材料（如枫树），长久浸在氢氟酸中往往有所损伤，改用此法能收到较好效果，步骤如下：
A. 将材料切成小块后浸入95%乙醇中1 ～ 2 d。
B. 移入丙酮2 ～ 6 h，以除去乙醇。
C. 移入0.12 g/mL醋酸纤维素丙酮液（醋酸纤维素12 g溶于丙酮，定容至100 mL）。
材料在此液中浸泡一段时间后即可软化。如果将材料按前面所述，先放入水中煮沸，用冷热法将空气抽除，再按上法软化也可。
浸泡的时间视木材硬度而定，质地较软的木材处理2 d左右，极硬材料处理7 d左右。若升高温度至40 ℃，可缩短软化时间。软化后的材料，可以移入丙酮中溶去醋酸纤维素，然后再移入乙醇中，并下行至水，以后可进行染色等一系列程序。
（四）思考题
1.木材切片为什么要经过排气和软化过程？
2.木材的3种软化方法各有哪些优缺点？
（五）实验报告
1．你的实验结果（贴图）
2．实验总结（心得与体会）
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