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肠系膜铺片实验操作及注意事项

时间:2023-06-26 理论教育 版权反馈
【摘要】:(一)用具与药品蜡盘、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、0.01 g/mL硝酸银水溶液、0.007 5 g/mL生理盐水、各级乙醇、二甲苯、中性树胶。染色滴加1%硝酸银水溶液于肠系膜上,将其覆盖。立即置日光下3~5 min或灯光下10~20 min,肠系膜变为浅褐色时,倒去硝酸银水溶液,用蒸馏水洗去残留染液。注意滴胶前一定要小心将肠系膜展平。图2-15蛙的肠系膜铺片(四)思考题铺片上滴加硝酸银溶液后,要立即置日光或灯光下,其作用是什么?

肠系膜铺片实验操作及注意事项

(一)用具与药品

蜡盘(或小软木板)、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、0.01 g/mL硝酸银水溶液、0.007 5 g/mL生理盐水、各级乙醇二甲苯、中性树胶。

(二)材料

蛙或蟾蜍的肠系膜、鱼的肠系膜。

(三)操作步骤(以蛙的肠系膜为例)

(1)麻醉 将活蟾蜍置于放有乙醚棉球的倒置烧杯内,使之被麻醉致死。

(2)取材 固定动物四肢于蜡盘上,剪开腹部皮肤和腹壁,用镊子取下小肠处肠系膜约1 cm2,生理盐水洗净后放于载玻片上。

(3)染色 滴加1%硝酸银水溶液于肠系膜上,将其覆盖。立即置日光下3~5 min或灯光下10~20 min,肠系膜变为浅褐色时,倒去硝酸银水溶液,用蒸馏水洗去残留染液。

(4)如是临时装片,此时可滴加1~2滴甘油,盖上盖玻片立即观察。如要制成永久装片,则从第3步直接进入第5步。

(5)在自来水中放数分钟。

(6)脱水 依次浸入50%乙醇、70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇Ⅰ、95%乙醇Ⅱ、100%乙醇Ⅰ、100%乙醇Ⅱ中进行脱水,各10 min。并在95%乙醇Ⅰ中将肠系膜稍加修剪成规则的小块。(www.xing528.com)

(7)透明 依次浸入50%二甲苯、100%二甲苯Ⅰ、100%二甲苯Ⅱ中,各10 min。

(8)封藏 用中性树胶封片。注意滴胶前一定要小心将肠系膜展平。

染色结果:细胞边界呈黑色,细胞核细胞质浅棕黄色或近无色(图2-15)。

图2-15 蛙的肠系膜铺片

(四)思考题

铺片上滴加硝酸银溶液后,要立即置日光或灯光下,其作用是什么?

(五)实验报告

1.你的实验结果(贴图)

2.实验总结(心得与体会)

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