【摘要】:(一)用具与药品小剪刀、小镊子、解剖刀(手术刀)、载玻片、盖玻片、记号笔(或蜡笔)、纱布(或毛巾)、滤纸、吸水纸、甲醇、pH6.4~6.8的磷酸缓冲液、瑞氏-吉姆萨染色液、中性树胶。每一切面可印2~3个印迹。图2-13鱼肾脏印片图2-14原始血细胞的有丝分裂过程①前期;②③中期;④⑤后期;⑥末期(四)思考题如何制备一张合格的造血组织印片?
(一)用具与药品
小剪刀、小镊子、解剖刀(手术刀)、载玻片、盖玻片、记号笔(或蜡笔)、纱布(或毛巾)、滤纸、吸水纸、甲醇、pH6.4~6.8的磷酸缓冲液、瑞氏-吉姆萨染色液、中性树胶。
(二)材料
鱼的肾脏或脾脏(造血组织)。
(三)操作步骤
(1)处死 把鱼断头处死或用麻醉剂麻醉处死。
(2)取肾脏 用浸湿的纱布把鱼固定,使其腹部朝上。用小剪刀从其泄殖孔向前剪开腹部,用小镊子轻轻取出肾脏置吸水纸上,吸去表面血迹。
(3)印片 取一张洁净的载玻片平放于实验台上,用解剖刀将肾脏切成小段,然后用小镊子轻轻夹起切小的肾脏组织块,将其切面轻轻在吸水纸上印一下,吸去大量的血液后,再在玻片上印印迹。每一切面可印2~3个印迹。
(4)干燥 手持印片在空气中来回摇晃几次,以加速其干燥。
(5)固定 待印片完全干燥后,放入甲醇中固定5 min。
(6)染色 从甲醇中取出干燥后染色,如印片数量多则缸染,数量少则滴染。滴加瑞氏-吉姆萨染色液染色约2 min。
(7)分色 滴加等量磷酸缓冲液或蒸馏水3 min,然后倾去染液,用水冲洗至血膜呈浅蓝紫色。(www.xing528.com)
(8)干燥 直立晾干或37 ℃烘干。
(9)封藏 用中性树胶封片。
染色结果:可见各细胞系的不同发育阶段的细胞(图2-13),还可见处于有丝分裂各时相的细胞(图2-14)。
图2-13 鱼肾脏印片
图2-14 原始血细胞的有丝分裂过程
①前期;②③中期;④⑤后期;⑥末期
(四)思考题
如何制备一张合格的造血组织印片?制作过程中应注意哪些细节?
(五)实验报告
1.你的实验结果(贴图)
2.实验总结(心得与体会)
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