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常用染色液配方及适用范围介绍

时间:2023-06-26 理论教育 版权反馈
【摘要】:此液常用于植物细胞,特别是花粉母细胞的涂片染色。此液适用于分离法制片中平滑肌的染色。此染色液常用于血细胞的染色。13.Ehrich苏木精染色液配方将苏木精溶于乙醇中,再加入冰醋酸后搅拌加速其溶解。14.Harris苏木精染色液配方先将苏木精溶于无水乙醇。15.Carazzi苏木精染色液配方将苏木精溶于甘油,钾矾溶于380 mL蒸馏水。此液特别适用于活检组织经冷冻切片的进行性染色。

常用染色液配方及适用范围介绍

1.硼砂洋红染色液

配方

将洋红2~3 g加入0.04 g/mL的硼砂水溶液100 mL中,煮沸30 min,静止72 h,再加入70%乙醇100 mL,静置24 h后过滤。该染色液适用于核的染色及整体标本的染色。

2.醋酸洋红染色液

配方

先将冰醋酸90 mL加入110 mL蒸馏水中加热煮沸,停火后,加入洋红1 g(缓慢加入,以防飞溅),滴入0.01 g/mL氢氧化铁水溶液数滴(5~10滴),直至溶液变为红葡萄酒色为止。过滤后储存于棕色瓶中备用。注意氢氧化铁不能加太多,否则洋红会沉淀。此液常用于植物细胞,特别是花粉母细胞的涂片染色。

3.醋酸地衣红染色液

配方

其配制流程与醋酸洋红相同,用法相似,用于花粉母细胞及根尖等的固定和染色,也用于动物组织弹性纤维的染色。

4.锂洋红染色液

配方

碳酸锂溶于蒸馏水中,再加入洋红,加热煮沸,停火后冷却过滤,存于棕色瓶中,备用。此液适用于分离法制片中平滑肌的染色。

5.伊红染色液

配方

伊红的种类很多,常用的是伊红B和伊红Y。伊红Y偏黄色调,伊红B偏蓝色调。一般配成0.005~0.010 g/mL的水溶液或乙醇溶液,用于复染细胞质

6.酸性品红乙醇液

配方

先在10 mL蒸馏水中溶解2 g酸性品红,然后加入90 mL无水乙醇。此液适用于骨组织的染色。

7.改良苯酚品红染色液

配方

酸性品红的70%乙醇溶液:将3 g碱性品红溶于100 mL 70%酒精中(此液可长期保存)。

配置方法:将酸性品红的70%乙醇溶液0.8 mL加入7.4 mL苯酚水溶液中,然后依次加入冰醋酸0.9 mL、甲醛0.9 mL和45%醋酸水溶液90 mL,最后加入山梨醇1.8 g。置于棕色瓶中保存备用。可用于植物根尖的染色。

8.醛品红染色液

配方

将碱性品红溶于70%乙醇,然后加入浓盐酸和三聚乙醛,轻轻摇动使其混合均匀,于室温下静置1~2 d,待变为紫色即为成熟。过滤,贮存于小口砂塞瓶中,4℃保存备用。

9.瑞氏-吉姆萨染色液

配方

将两种染色剂放入研钵内,加入甲醇研磨均匀,再加入甘油研磨均匀后倒入洁净棕色瓶内,密封。置于37 ℃温箱中,每天早晚各摇匀1次,1周后可用。甘油的量可根据当地空气湿度情况酌情加入,湿度很大时也可不加甘油。此染色液常用于血细胞的染色。

10.Delafied苏木精染色液

配方

先将苏木精溶于无水乙醇,待溶解后,加入铵矾(硫酸铝铵)饱和水溶液内(浓度约0.1 g/mL),摇匀后过滤。再加入甘油和甲醇的混合液中,充分混匀后,置于阳光充足处1~2个月或暴露于空气中3~4个月,成熟后即可染色。此染色液是最常用的细胞核染色液。此液成熟后须密封置于阴冷处,可长期保存使用。

11.Heidenhain铁(矾)苏木精染色液

甲液(媒染剂):铁矾(硫酸铁铵)2~4 g溶于100 mL蒸馏水中。

低温避光保存。该液需临用时配制,不能长期保存。如需长期保存则按以下配方配制成长期贮存液。

长期贮存液

配方

乙液(染色液):(www.xing528.com)

配方

使用前6周配制。先将苏木精溶于5 mL的95%乙醇中,用纱布盖瓶或倾盖瓶盖使之与空气接触而充分氧化。用时再加100 mL蒸馏水。此液可保存半年。

注意:甲液和乙液不能混合,需单独储存和使用。

12.Mayer苏木精染色液

配方

将苏木精加入煮沸的蒸馏水内,搅拌充分溶解后,依次加入钾矾(硫酸铝钾)、碘酸钠使之充分溶解,最后加入水合氯醛和枸橼酸。加热煮沸5 min,冷却后过滤使用。染色时间5~10 min,染色能力较Ehrich苏木精强,核染色鲜明。但染色液需新鲜配制,属于进行性染色,染色后不需分色。配方中钾钒也可用铵矾(硫酸铝铵)代替。

13.Ehrich苏木精染色液

配方

将苏木精溶于乙醇中,再加入冰醋酸后搅拌加速其溶解。苏木精溶解就加入甘油搅拌。将钾矾磨碎并溶于50 mL热水中,全溶后逐滴加入苏木精混合液中并搅拌。最后将瓶口用数层纱布封口,置于通风处,并经常摇动促进苏木精氧化成熟。成熟时间大约需要1~2月。染色20 min后用1%盐酸分色,流水充分水洗。颜色持久不易褪色。染液成熟后可保存1年以上。若加入0.2 g碘酸钠,可立即使用。Ehrich苏木精染色液可染某些糖胺聚糖(黏多糖物质)如软骨及骨的黏合线,钙化区也可被染,呈深蓝色,但对冷冻切片染色效果不好。

14.Harris苏木精染色液

配方

先将苏木精溶于无水乙醇。将铵矾溶于水,加热溶解后加入苏木精乙醇液,煮沸后熄火并慢慢(防止液体溅出)加入氧化汞,全溶后于冷水中快速冷却。冷却液过滤后加入冰醋酸。染液冷却后呈深紫红色。因染色液中加有氧化剂,不能长期保存,保存期1~2月。

15.Carazzi苏木精染色液

配方

将苏木精溶于甘油,钾矾溶于380 mL蒸馏水。待全溶后,将钾矾液慢慢倒入苏木精甘油液,边加边摇荡使之充分混合。将碘酸钾加入20 mL蒸馏水内,稍加热至全溶,待冷后慢慢倒入苏木精-甘油-钾矾混合液,边加边摇至完全混匀即可。保存期半年。此液特别适用于活检组织经冷冻切片的进行性染色。染色步骤简便,能使核着色清晰,细胞质不着色,染色后不需分化。

推荐步骤:

(1)冷冻切片8 μm,室温固定于10%甲醛溶液20 s,流水冲洗1次;

(2)苏木精染色1 min,流水冲洗10~20 s(使核色返蓝);

(3)伊红染色液复染10 s,流水冲洗1次;

(4)脱水、透明、封片。

16.Mallory磷钨酸苏木精染色液

配方

将苏木精和磷钨酸分别溶于500 mL水中(可加热),待完全溶解后,将两液混合摇匀。贮存于棕色瓶内放置数月,待其自然成熟。如急用,可加入0.35 g高锰酸钾促其成熟。

17.碘酸钠-苏木精染色液

配方

先将钾矾溶于蒸馏水中,再依次加入苏木精、碘酸钠和浓硝酸。此液因加入了氧化剂,须临用前配制。

18.Cason三色法(Mallory一步三色法)染色液

配方

先取蒸馏水50 mL,依次将酸性品红、苯胺蓝、橘黄G慢慢加入水中,混合后稍加温溶解。再用另一容器取蒸馏水50 mL,将磷钨酸溶解。然后把两液混合搅匀,过滤使用。

19.Schiff试剂

配方

先将200 mL双蒸水煮沸,再加入1 g碱性品红,搅拌使其完全溶解。冷却至50 ℃加入1 mol/L盐酸20 mL,待25 ℃时加入2 g偏重亚硫酸钠。此液置黑暗处18~24 h,加入活性炭2 g,充分摇荡5 min,之后变为无色或浅黄色液体。过滤,棕色瓶内装好,封口,放入冰箱中保存,备用。

20.苏丹黑B染色液

配方

将300 mg苏丹黑B溶于100 mL70%乙醇中,磁力搅拌器搅拌2 h后密封过夜。用时过滤。保存时间不超过2周,超过2周染色效果下降。

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