种子罐压差接种方法详解

一、任务目标

（1）正确掌握压差接种方法。

（2）通过种子罐压差接种，进一步加深对无菌操作重要性的认识和理解。

二、材料器具

1. 材料

摇瓶种子，95%酒精，75%酒精棉，打火机，棉花，棉手套。

2. 主要仪器设备

种子罐，钳子，接种口扳手等。

三、任务实施

种子罐压差接种工艺如图6-14所示。

图6-14 种子罐压差接种工艺示意图

1. 接种前准备

将无污染的摇瓶种子在超净工作台上按无菌操作要求并入接种瓶，并与已灭菌的接种管（含阀门及卡盘）连接好。将接种瓶端卡盘与种子罐端卡盘连接好（注意垫片要放好，确保管道密封）。

2. 管道灭菌

打开S16、H13，排尽管路冷凝水后H13转为微开，进行管道灭菌计时，常规下灭菌30min。灭菌结束，关闭H13、S16，打开P16、H13，排尽管道内蒸汽，关闭H13，打开P17，无菌空气进入接种瓶。(www.xing528.com)

3. 接种

收小A15开度，缓慢打开A17，罐压逐渐降低至0.03MPa，种子液即可进入罐内。如果一次降压未能将种子液全部接入罐内，可打开A15，重复操作一次。

4. 再灭菌

接种完毕，关闭P16、P17。打开S16、H13，将接种管道重新消毒后，拆卸接种卡盘，清洗种子瓶及软管等组件，备用。

四、注意事项

（1）控制罐压不要超过0.08MPa。

（2）整个接种过程不得有人对着接种口说话，防止唾液飞溅。

（3）接种时，关闭发酵工段门窗，减少空气的流动，防止火焰飘忽不定。

五、任务考核

（1）接种操作前准备工作到位。（30分）

（2）罐压调节正确，未出现罐压掉“0”现象。（20分）

（3）移种操作熟练，正确、无差错。（50分）

项目拓展（六）