种子罐如何进行火焰保护接种？

一、任务目标

（1）正确掌握火焰保护接种方法。

（2）通过接种，进一步加深对无菌操作重要性的认识和理解。

二、材料器具

1. 材料

95%酒精，摇瓶种子，75%酒精棉，打火机，棉花，棉手套。

2. 主要仪器设备

种子罐，钳子，接种口扳手等。

图6-13 种子罐火焰保护接种工艺示意图

三、任务实施

种子罐火焰保护接种工艺如图6-13所示。

1. 接种前准备

将无污染的摇瓶种子在超净工作台上合并后备用。准备好打火机、75%酒精棉、95%酒精、棉花、钳子及接种口扳手等。用酒精棉擦洗罐顶接种口，并在接种口酒精环内放上棉花，倒上适量95%酒精。接种者双手需用酒精棉擦洗消毒。

2. 罐压调节(www.xing528.com)

调节进气阀A15的开度为微开，减少进气量，保证接种口有微量气体排出。检查罐内压力在0.01MPa以下，点燃接种口四周的酒精棉。如果罐压不在0.01MPa以下，应开大排气阀或调小进气阀。

3. 接种

用专用扳手拧下接种口螺母，并将其放入预先准备的盛有75%酒精的培养皿中。在火焰上拔下种子瓶瓶塞，在火焰上灼烧瓶口，迅速将菌种倒入罐内。盖上接种口螺母，拧紧，熄灭火焰，并用75%酒精棉将接种口四周清理干净。

4. 罐压调节

调节种子罐进气阀、排气阀，维持种子罐培养所需的正常压力。

四、注意事项

（1）棉花和95%酒精不宜过多，否则点燃后火焰高不易操作，容易造成烫伤。整个操作过程，接种工最好能戴完全浸湿的棉手套。

（2）进气阀A15不能完全关闭，保证罐压接近于 “0”，但又不能为 “0”，否则有可能使外界空气进入罐内引起污染；罐压也不能过高，如果罐压过高，接种口排气量过大，接种时，罐内空气从接种口喷出，有可能会将酒精棉吹灭，造成染菌。

（3）接种完毕，螺母不能拧得太紧，防止损坏密封圈。

五、任务考核

（1）接种操作前准备工作到位。（30分）

（2）罐压调节正确，未出现罐压掉“0”现象。（20分）

（3）接种操作熟练，正确、无差错。（50分）