一、任务目标
(1)正确掌握火焰保护接种方法。
(2)通过接种,进一步加深对无菌操作重要性的认识和理解。
二、材料器具
1. 材料
95%酒精,摇瓶种子,75%酒精棉,打火机,棉花,棉手套。
2. 主要仪器设备
种子罐,钳子,接种口扳手等。
图6-13 种子罐火焰保护接种工艺示意图
三、任务实施
种子罐火焰保护接种工艺如图6-13所示。
1. 接种前准备
将无污染的摇瓶种子在超净工作台上合并后备用。准备好打火机、75%酒精棉、95%酒精、棉花、钳子及接种口扳手等。用酒精棉擦洗罐顶接种口,并在接种口酒精环内放上棉花,倒上适量95%酒精。接种者双手需用酒精棉擦洗消毒。
2. 罐压调节(www.xing528.com)
调节进气阀A15的开度为微开,减少进气量,保证接种口有微量气体排出。检查罐内压力在0.01MPa以下,点燃接种口四周的酒精棉。如果罐压不在0.01MPa以下,应开大排气阀或调小进气阀。
3. 接种
用专用扳手拧下接种口螺母,并将其放入预先准备的盛有75%酒精的培养皿中。在火焰上拔下种子瓶瓶塞,在火焰上灼烧瓶口,迅速将菌种倒入罐内。盖上接种口螺母,拧紧,熄灭火焰,并用75%酒精棉将接种口四周清理干净。
4. 罐压调节
调节种子罐进气阀、排气阀,维持种子罐培养所需的正常压力。
四、注意事项
(1)棉花和95%酒精不宜过多,否则点燃后火焰高不易操作,容易造成烫伤。整个操作过程,接种工最好能戴完全浸湿的棉手套。
(2)进气阀A15不能完全关闭,保证罐压接近于 “0”,但又不能为 “0”,否则有可能使外界空气进入罐内引起污染;罐压也不能过高,如果罐压过高,接种口排气量过大,接种时,罐内空气从接种口喷出,有可能会将酒精棉吹灭,造成染菌。
(3)接种完毕,螺母不能拧得太紧,防止损坏密封圈。
五、任务考核
(1)接种操作前准备工作到位。(30分)
(2)罐压调节正确,未出现罐压掉“0”现象。(20分)
(3)接种操作熟练,正确、无差错。(50分)
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