测定罐头中的甜蜜素含量方法：环己基氨基磺酸钠

1.原理

在硫酸介质中环己基氨基磺酸钠与亚硝酸反应，生成环己醇亚硝酸酯，利用气相色谱法进行定性和定量。

2.仪器与试剂

（1）仪器 气相色谱仪（附氢火焰离子化检测器）、旋涡混合器、离心机、10μL微量注射器。

（2）试剂

1）正己烷。

2）氯化钠。

3）层析硅胶（或海砂）。

4）50g/L亚硝酸钠溶液。

5）100g/L硫酸溶液。

6）环己基氨基磺酸钠标准溶液：精确称取1.0000g环己基氨基磺酸钠，加入水溶解并定容至100mL，此溶液每毫升含环己基氨基磺酸钠10mg。

3.色谱条件

（1）色谱柱 长度为2m，内径为3mm，U形不锈钢柱。

（2）固定性 ChromosorbWAWDMCS80～100目，涂以10%SE-30。

（3）测定条件

1）柱温为80℃，汽化温度为150℃，检测温度为150℃。

2）流速：氮气为40mL/min，氢气为30mL/min，空气为300mL/min。

4.试样的处理

（1）液体试样 摇匀后直接称取。含二氧化碳的试样先加热除去二氧化碳，含酒精的试样加40g/L氢氧化钠溶液调至碱性，于沸水浴中加热除去酒精，制成试样。

（2）固体试样 将其剪碎制成试样。

5.分析步骤

（1）试样的制备

1）液体试样：称取20.0g试样置于100mL带塞比色管，然后将比色管置于冰浴中。(www.xing528.com)

2）固体试样：称取2.0g已剪碎的试样置于研钵中，加少许层析硅胶（或海砂）研磨至呈干粉状，经漏斗倒入100mL容量瓶中，加水冲洗研钵，并将洗液一并转移至容量瓶中，加水至刻度，不时摇动，1h后过滤，即得试样。从中准确吸取20mL置于100mL带塞比色管，然后将比色管置于冰浴中。

（2）测定

1）标准曲线的绘制：准确吸取1.00mL环己基氨基磺酸钠标准溶液置于100mL带塞比色管中，加水20mL，置于冰浴中，加入5mL/50g/L亚硝酸钠溶液和5mL100g/L硫酸溶液，摇匀，在冰浴中放置30min，并经常摇动，然后准确加入10mL正己烷和5g氯化钠，摇匀后置旋涡混合器上振动1min（或振摇80次），待静止分层后吸出己烷层于10mL带塞离心管中进行离心分离，每毫升己烷提取液相当于1mg环己基氨基磺酸钠。将标准提取液进样1～5μL于气相色谱仪中，根据响应值绘制标准曲线。

2）试样管按标准曲线的绘制中自“加入5mL50g/L亚硝酸钠溶液”起进行操作，然后将试样同样进样1～5μL，测得响应值，从标准曲线上查出相应含量。

6.结果计算

式中 X——试样中环己基氨基横酸钠的含量（g/kg）；

m——试样质量（g）；

V——进样体积（μL）；

10——正己烷加入量（mL）；

m₁——测定用试样中环己基氨基磺酸钠的质量（μg）。

计算结果保留两位有效数字。

7.精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

式中 X——试样中环己基氨基横酸钠的含量（g/kg）；

m——试样质量（g）；

V——进样体积（μL）；

10——正己烷加入量（mL）；

m₁——测定用试样中环己基氨基磺酸钠的质量（μg）。

计算结果保留两位有效数字。

7.精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。