1.原理
茶叶中的多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色配位化合物,用分光光度计法测定其含量。
2.仪器与试剂
(1)仪器 分析天平(感量为0.001g)、分光光度计。
(2)试剂 所用试剂均为分析纯(AR),试验用水应符合GB/T 6682—2008中的三级水规格。
1)酒石酸亚铁溶液:称取硫酸亚铁0.1g和酒石酸钾钠0.5g,用水溶解并定容至100mL(低温保存,有效期为10天)
①23.87g/L磷酸氢二钠:称取磷酸二氢钠23.87g,加水溶解后定容至1L。
②9.08g/L磷酸二氢钾:称取经110℃烘干2h的磷酸二氢钾9.08g,加水溶解后定容至1L,从中取15mL与23.87磷酸氢二钠85mL混合均匀。
3.操作步骤
(1)试液的制备
1)较透明的样液(如果味茶饮料等):将样液充分摇匀后,备用。
2)较浑浊的样液(如果汁茶饮料、奶茶饮料等):称取充分混匀的样液25.00g置于50mL容量瓶中,加入体积分数为95%的乙醇15mL,充分摇匀,放置15min后,用水定容至刻度,用慢速定量滤纸过滤,滤液备用。(www.xing528.com)
3)含碳酸气的样液:量取充分混匀的样液100.00g置于250mL烧杯中,称取其总质量,然后置于电炉上加热至沸,在微沸状态下加热10min,将二氧化碳气排除,冷却后,用水补足其原来的质量,摇匀后,备用。
(2)测定 精确称取上述制备的试液1~5g置于25mL容量瓶中,加水4mL、酒石酸亚铁溶液5mL,充分摇匀,用pH=7.5的磷酸缓冲溶液定容至刻度。用10mm比色皿,在波长540nm处,以试剂空白作参比,测定其吸光度(A1)。同时称取等量的试液置于25mL容量瓶中,加水4mL,用pH=7.5的磷酸缓冲溶液定容至刻度,测定其吸光度(A2),以试剂空白作参比。
4.结果计算
样品中茶多酚的含量按式(3-2-36)计算。
式中 X——样品中茶多酚的含量(mg/kg);
A1——试液显色后的吸光度;
A2——试液底色的吸光度;
1.957——用10mm比色皿,当吸光度等于0.50时,1mL茶汤中茶多酚的含量相当于1.957mg;
K——稀释倍数;
m——测定时称取试液的质量(g)。
允许差:同一样品的两次平行测定结果之差不得超过平均值的5%。
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