测定苏打饼干中的铅含量技能训练

铅对人体有害，在体内蓄积会造成慢性中毒。一般植物性原料中会携带极少量的铅，但其含量一般不会超过规定限制。大多数铅含量超标的原因是在一定条件下产品加工用的机械设备、管道，以及包装、储存、运输过程中的铅，逐渐迁移到食品中，造成污染。因此，测定铅的含量一方面可以反映出食品矿物质的含量，进而判断其营养价值的高低；另一方面也可以反映出食品受污染的程度，评定食品的卫生质量。

比色法是基于朗伯-比尔定律的通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法。其操作快速、简便，在食品检验中被广泛应用。在GB 7100—2003中要求，饼干中铅的含量小于或等于0.5mg/kg。

1.原理

试样经消化后，在pH=8.5～9.0时，铅离子与二硫腙生成红色配位化合物，溶于三氯甲烷，加入柠檬酸铵、氰化钾和盐酸羟胺等，防止铁、铜、锌等离子干扰，与标准系列比较定量。

2.仪器与试剂

（1）仪器 分光光度计、天平（感量为1mg）。

（2）试剂 （1+1）氨水（量取100mL氨水，加入100mL水中）、（1+1）盐酸溶液（量取100mL盐酸，加入100mL水中）、1g/L酚红指示液（称取0.10g酚红，用少量乙醇分多次溶解后移入100mL容量瓶中并定容至刻度）、100g/L氰化钾溶液（称取10.0g氰化钾，用水溶解后稀释至100mL）、三氯甲烷（不应含氧化物）、（1+99）硝酸（量取1mL硝酸，加入99mL水中）、（4+1）硝酸-硫酸混合液。其他试剂如下：

1）盐酸羟胺溶液（200g/L）：称取20.0g盐酸羟胺，加水溶解至50mL，加2滴酚红指示液，加（1+1）氨水，调pH值至8.5～9.0（由黄变红，再多加2滴），用二硫腙-三氯甲烷溶液（试剂10）提取至三氯甲烷层绿色不变为止，再用三氯甲烷洗两次，弃去三氯甲烷层，水层加（1+1）盐酸溶液至呈酸性，加水至100mL。

2）柠檬酸铵溶液（200g/L）：称取50g柠檬酸铵，溶于100mL水中，加2滴酚红指示液，再加（1+1）氨水将pH值调为8.5～9.0，用二硫腙-三氯甲烷溶液提取数次，每次10～20mL，至三氯甲烷层绿色不变为止，弃去三氯甲烷层，再用三氯甲烷洗两次，每次用量为5mL，弃去三氯甲烷层，加水稀释至250mL。

3）淀粉指示液：称取0.5g可溶性淀粉，加5mL水搅匀后，慢慢倒入100mL沸水中，边倒边搅拌，煮沸，放冷备用，临用时配制。

4）二硫腙-三氯甲烷溶液（0.5g/L）：称取0.5g研细的二硫腙，溶于1L三氯甲烷中，置于冰箱中保存，有时要对二硫腙进行纯化后再用其配制溶液。

5）二硫腙使用液：吸取1.0mL二硫腙溶液，加三氯甲烷至10mL，混匀，备用。用1cm比色皿，分别盛放上述备用溶液和三氯甲烷，以三氯甲烷调节零点，于波长510nm处测其吸光度（A），用式（3-2-11）算出配制100mL二硫腙使用液（70%透光率）所需二硫腙溶液的毫升数（V）。

6）铅标准溶液（1.0mg/mL）：准确称取0.1598g硝酸铅，加10mL（1+99）硝酸，全部溶解后，移入100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。

7）铅标准使用液（10.0μg/mL）：吸取1.0mL铅标准溶液，置于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。(www.xing528.com)

3.操作步骤

（1）样品预处理 取苏打饼干适量，磨碎后过20目筛，储于塑料瓶中，保存备用。在采样和制备过程中，应注意不使试样污染。

（2）试样消化 取粉碎后的苏打饼干样品5～10g（精确到0.01g），置于250～500mL定氮瓶中，先加水少许使其湿润，再加数粒玻璃珠和10～15mL硝酸，放置片刻，小火缓缓加热，待作用缓和，放冷，沿瓶壁加入5mL或10mL硫酸，再加热，至瓶中液体开始变成棕色时，不断沿瓶壁滴加硝酸至有机质分解完全，加大火力，至产生白烟，待瓶口白烟冒净后，瓶内液体再产生白烟时说明消化完全。该溶液应澄清无色或微带黄色，放冷（在操作过程中应注意防止爆沸或爆炸），加20mL水煮沸，除去残余的硝酸至产生白烟为止。如此处理两次，放冷，将冷后的溶液移入50mL或100mL容量瓶中，用水洗涤定氮瓶，将洗液并入容量瓶中，放冷，加水至刻度，混匀。定容后的溶液每10mL相当于1g样品，相当于加入硫酸1mL。取与消化试样相同量的硝酸和硫酸，按同一方法做试剂空白试验。

（3）标准系列和样品的吸光度测定 吸取10.0mL消化后的定容溶液和同量的试剂空白液，分别置于125mL分液漏斗中，各加水至20mL。吸取0mL、0.10mL、0.20mL、0.30mL、0.40mL、0.50mL铅标准使用液，分别置于125mL分液漏斗中，各加（1+99）硝酸至20mL。向试样消化液、试剂空白液和铅标准液中各加2.0mL柠檬酸铵溶液、1.0mL盐酸羟胺溶液和2滴酚红指示液，用氨水调至红色，再各加2.0mL氰化钾溶液，混匀，各加5.0mL二硫腙使用液，剧烈振摇1min，静置分层后，将三氯甲烷层经脱脂棉滤入1cm比色杯中，以三氯甲烷调节零点，于波长510nm处测吸光度，各点减去零管吸收值后，绘制标准曲线或计算一元回归方程，将试样与标准曲线比较。

4.分析结果

试样中铅的含量按式（3-2-12）计算。

式中 X——试样中铅的含量（mg/kg）；

m₁——测定用试样中铅的质量（μg）；

m₂——试剂空白液中铅的质量（μg）；

m₃——试样质量（g）；

V₁——试样处理液的总体积（mL）；

V₂——测定用试样处理液的总体积（mL）。

结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留两位有效数字。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。