测定谷类粮食中有机磷农药残留量的技能训练方法

1.原理

将含有机磷的样品溶液在富氢焰上燃烧时，其会以HPO碎片的形式放射出波长为526nm的特性光，这种光通过滤光片选择后，由光电倍增管接收，转换成电信号，经微电流放大器放大后被记录下来，将样品的峰面积或峰高与标准品的峰面积或峰高进行比较定量。

2.仪器与试剂

（1）仪器 组织捣碎机、粉碎机、旋转蒸发仪、气相色谱仪[附有火焰光度检测器（FPD）]。

（2）试剂 丙酮、二氯甲烷、氯化钠、无水硫酸钠、助滤剂Celite545。农药标准品如下：

1）敌敌畏（DDVP）：纯度大于或等于99%。

2）速灭磷（mevinphos）：顺式纯度大于或等于60%，反式纯度大于或等于40%。

3）久效磷（monocrotophos）：纯度大于或等于99%。

4）甲拌磷（phorate）：纯度大于或等于98%。

5）巴胺磷（propetumphos）：纯度大于或等于99%。

6）二嗪磷（diazinon）：纯度大于或等于98%。

7）乙嘧硫磷（etrimfos）纯度大于或等于97%。

8）甲基嘧啶磷（parathion-methyl）：纯度大于或等于99%。

9）甲基对硫磷（parathion-methyl）：纯度大于或等于99%。

10）稻瘟净（kitazine）：纯度大于或等于99%。

11）水胺硫磷（isocarbophos）：纯度大于或等于99%。

12）氧化喹硫磷（po-quinalphos）：纯度大于或等于99%。

13）稻丰散（phenthoate）：纯度大于或等于99.6%。

14）甲喹硫磷（methdathion）：纯度大于或等于99.6%。

15）克线磷（phenamiphos）：纯度大于或等于99.9%。

16）乙硫磷（ethion）：纯度大于或等于95%。

17）乐果（dimethoate）：纯度大于或等于99.0%。

18）喹硫磷（quinaphos）：纯度大于或等于98.2%。

19）对硫磷（parathion）：纯度大于或等于99.0%。

20）杀螟硫磷（fenitrothion）：纯度大于或等于98.5%。

农药标准溶液的配制：分别准确称取以上农药标准品，用二氯甲烷为溶剂，分别配制成1.0mg/mL的标准储备液，储于冰箱（4℃）中，使用时根据各农药品种的仪器响应情况，吸取不同量的标准储备液，用二氯甲烷稀释成混合标准使用液。

3.试样的制备

取样品用粉碎机粉碎，过20目筛制成粮食试样。

4.操作步骤

（1）提取 称取25.00g试样置于300mL烧杯中，加入50mL水和100mL丙酮（提取液总体积为150mL），用组织捣碎机提取1～2min，匀浆液经铺有两层滤纸和约10g Celite 545的布氏漏斗减压抽滤，从滤液中分取100mL移至500mL分液漏斗中。

（2）净化 向提取所得的滤液中加入10～15g氯化钠使溶液处于饱和状态，猛烈振摇2～3min，静置10min，使丙酮从水相中盐析出来，水相用50mL二氯甲烷振摇2min，再静置分层。

将丙酮与二氯甲烷提取液合并，经装有20～30g无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水滤入250mL圆底烧瓶中，再用约40mL二氯甲烷分数次洗涤容器和无水硫酸钠，将洗涤液也转入烧瓶中，用旋转蒸发器浓缩至约2mL，将浓缩液定量转移至5～25mL容量瓶中，加二氯甲烷定容至刻度。(www.xing528.com)

（3）气相色谱测定

1）色谱参考条件

①色谱柱

a.玻璃柱2.6m×3mm（i.d），填装涂有4.5%DC-200+2.5%OV-17的Chromosorb W A W DMCS（80～100目）的担体。

b.玻璃柱2.6m×3mm（i.d），填装涂有质量分数为1.5%的QF-1的ChromosorbW A W DMCS（60～80目）。

②气体速度：氮气（N₂）为50mL/min，氢气（H₂）为100mL/min，空气为50mL/min。

③温度：柱箱为240℃，汽化室为260℃，检测器为270℃。

2）测定：吸取2～5μL混合标准液及样品净化液注入色谱仪中，以保留时间定性，以试样的峰高或峰面积与标准比较定量。

5.结果计算

式中 X_i——i组分有机磷农药的含量（mg/kg）；

A_i——试样中i组分的峰面积（积分单位）；

A_si——混合标准液中i组分的峰面积（积分单位）；

V₁——试样提取液的总体积（mL）；

V₂——净化用提取液的总体积（mL）；

V₃——浓缩后的定容体积（mL）；

V₄——进样体积（mL）；

E_si——注入色谱仪中的i标准组分的质量（ng）；

m——样品的质量（g）。

计算结果保留两位有效数字。

6.注意事项

1）本方法适用于谷类粮食中敌敌畏、速灭磷、久效磷、甲拌磷、巴胺磷、二嗪磷、乙嘧硫磷、甲基嘧啶磷、甲基对硫磷、稻瘟净、水胺硫磷、氧化喹硫磷、稻丰散、甲喹硫磷、克线磷、乙硫磷、乐果、喹硫磷、对硫磷、杀螟硫磷的残留量分析方法。

2）16种有机磷农药的色谱图如图3-2-4所示。

图3-2-4 16种有机磷农药的色谱图

1—敌敌畏，最低检测浓度为0.005mg/kg 2—速灭磷，最低检测浓度为0.004mg/kg 3—久效磷，最低检测浓度为0.014mg/kg 4—甲拌磷，最低检测浓度为0.004mg/kg 5—巴胺磷，最低检测浓度为0.011mg/kg 6—二嗪磷，最低检测浓度为0.003mg/kg 7—乙嘧硫磷，最低检测浓度为0.003mg/kg 8—甲基嘧啶磷，最低检测浓度为0.004mg/kg 9—甲基对硫磷，最低检测浓度为0.004mg/kg 10—稻瘟净，最低检测浓度为0.004mg/kg 11—水胺硫磷，最低检测浓度为0.005mg/kg 12—氧化喹硫磷，最低检测浓度为0.025mg/kg 13—稻丰散，最低检测浓度为0.017mg/kg 14—甲喹硫磷，最低检测浓度为0.014mg/kg 15—克线磷，最低检测浓度为0.009mg/kg 16—乙硫磷，最低检测浓度为0.014mg/kg

3）13种有机磷农药的色谱图如图3-2-5所示。

图3-2-5 13种有机磷农药的色谱图

1—敌敌畏 2—甲拌磷 3—二嗪磷 4—乙嘧硫磷 5—巴胺磷 6—甲基嘧啶磷 7—异稻瘟净 8—乐果 9—喹硫磷 10—甲基对硫磷 11—杀螟硫磷 12—对硫磷 13—乙硫磷