1.原理
用三氯乙酸提取肉和肉制品中的聚磷酸盐，提取液经乙醇、乙醚处理后，在微晶纤维素薄层层析板上分离，通过喷雾显色，检验聚磷酸盐。
2.仪器与试剂
（1）仪器 实验室常规设备，以及机械设备（用于试样的均质，包括绞肉机、斩拌机等肉类组织粉碎机）、均浆器、涂布器（涂布厚度为0.25mm）、玻璃板（10cm×20cm，5cm×20cm）、层析缸、微量注射器、吹风机（有冷、热风挡）、喷雾器、干燥箱、干燥器。
（2）试剂 所用试剂均为分析纯，试验用水应符合GB/T 6682—2008的要求。用到的试剂主要有：异丙醇、硝酸、75g/L四水合钼酸铵溶液（称取75g四水合钼酸铵，用水溶解并定容至1000mL）、氢氧化铵、酒石酸、150g/L焦亚硫酸钠（称取150g焦亚硫酸钠，用水溶解并定容至1000mL）、200g/L亚硫酸钠（称取200g亚硫酸钠，用水溶解并定容至1000mL）、1-氨基-2-萘酚-4-磺酸、乙酸钠、135g/L三氯乙酸溶液（称取135g三氯乙酸，用水定容至1000mL）、乙醚、乙醇（体积分数为95%）、可溶性淀粉、微晶纤维素。其他试剂如下：
1）标准参比混合液：在100mL水中溶解磷酸二氢钠（200mg）、焦磷酸四钠（300mg）、三磷酸五钠（200mg）、六偏磷酸钠（200mg）。标准参比混合液在4℃条件下可稳定至少4周。
2）展开剂：将140mL异丙醇、40mL三氯乙酸溶液和0.6mL氢氧化铵混合均匀，保存于密闭瓶中。
3）显色剂Ⅰ：量取50mL硝酸、50mL四水合铝酸铵溶液，混合均匀，在上述溶液中溶解10g酒石酸（现用现配）。
4）显色剂Ⅱ：将195mL焦亚硫酸钠溶液和5mL亚硫酸钠溶液混匀，然后称取0.5g1-氨基-2-萘酚-4-磺酸溶于上述溶液中，再称取40g乙酸钠溶于此溶液中。该溶液储存于密闭的棕色瓶中，可在4℃条件下保存1周。
3.分析步骤
（1）试样的准备 按GB/T 9695.19—2008规定的方法取样，至少取有代表性的试样200g，使用适当的机械设备将试样均质，均质后的试样要尽快分析，否则要密封低温储存，防止变质和成分发生变化。储存的试样在启用时，应重新混匀。
（2）薄层板的制备 将可溶性淀粉0.3g溶于90mL沸水中，冷却后加入15g微晶纤维素粉，用匀浆器匀浆1min，然后用涂布器把浆液涂在玻璃板上，铺成0.25mm厚的浆层，在室温下自然干燥1h，于100℃烘箱中加热10min，取出立即放入干燥器中。也可以用商品微晶纤维素板。
（3）提取液的制备
1）将50mL50℃左右的温水倒入装有50g试样的烧杯中，立即充分搅拌，加入10g三氯乙酸，彻底搅匀，放入冰箱冷却1h后用扇形滤纸过滤。
2）若滤液浑浊，则加入同体积的乙醚并摇匀，用吸管吸去乙醚，再加入同体积的乙醇，振摇1min，静置数分钟后再用扇形滤纸过滤。
（4）薄层层析分离(www.xing528.com)
1）将适量的展开剂倒入层析缸中，深度为5～10mm，盖上盖，避光静置30min。
2）用微量注射器吸取提取液3μL，若为经过澄清处理的提取液，则取6μL，在距薄层板板底约2cm处点样，每次点样1μL，使点的直径尽量小，并且边点边用吹风机冷风挡吹干。
注意：避免使用热风吹干，以防止磷酸盐水解。
3）用同样的方法，将标准参比液3μL点在同一块板上，距样品点1～1.5cm，距板底距离与样品点一致。
4）打开层析缸盖，迅速而小心地把点好样的薄层板放入缸中，盖上盖，在室温下避光展开。
5）展开到溶剂前沿上升约10cm处，取出薄层板，放入60℃干燥箱中干燥10min，或在室温下干燥30min，或用吹风机冷风挡吹干。
（5）磷酸盐的检验
1）将展开过的薄层板垂直立在通风橱中，用喷雾器把显色剂Ⅰ均匀地喷在薄层板上，使之显现出黄斑。
2）用吹风机吹干薄层板后，放入100℃干燥箱中至少干燥1h，把硝酸全部除去。将薄层板从干燥箱中取出，证实是否有刺鼻的硝酸味道。
3）在薄层板冷却至室温后，将其放入通风橱中，喷显色剂Ⅱ，使之呈现出明显的蓝斑。
注意：不是绝对要喷显色剂B，但此显色剂产生强烈的蓝斑可提高检测效果。
（6）结果计算 将试样斑点与聚磷酸盐标准混合液斑点的比移值相比较，计算其Rf。
正磷酸盐的斑点经常可见。如果样品中含有高浓度的磷酸盐，也可以看见二磷酸盐或聚合磷酸盐的斑点。参比混合液磷酸盐的Rf值如下：
正磷酸盐的Rf=0.70～0.80，焦磷酸盐的Rf=0.35～0.50，三磷酸盐的Rf=0.20～0.30，六偏磷酸盐的Rf=0。可用鲜肉的提取液校正磷酸盐的Rf值，鲜肉中只含正磷酸盐。
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