全脂乳粉蔗糖测定技能训练

1.原理

采用莱茵-埃农法检验乳粉中蔗糖的含量。试样经除去蛋白质后，其中的蔗糖经盐酸水解为还原糖，再按还原糖测定。水解前后的差值乘以相应的系数即为蔗糖含量。

2.仪器与试剂

（1）仪器 天平（感量为0.1mg）、水浴锅（温度可控制在75℃±2℃）。

（2）试剂

除非另有规定，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682—2008规定的三级水。

1）常用试剂：乙酸铅、草酸钾、磷酸氢二钠、盐酸、硫酸铜、浓硫酸、酒石酸钾钠、氢氧化钠、酚酞、乙醇、次甲基蓝。

2）乙酸铅溶液（200g/L）：称取200g乙酸铅，溶于水并稀释至1000mL。

3）草酸钾-磷酸氢二钠溶液：称取草酸钾30g，磷酸氢二钠70g，溶于水并稀释至1000mL。

4）（1+1）盐酸：1体积盐酸与1体积的水混合。

5）氢氧化钠溶液（300g/L）：称取300g氢氧化钠，溶于水并稀释至1000mL。

6）斐林溶液（甲液）：称取34.639g硫酸铜，溶于水中，加入0.5mL浓硫酸，加水至500mL。

7）斐林溶液（乙液）：称取173g酒石酸钾钠及50g氢氧化钠溶解于水中，稀释至500mL，静置两天后过滤。

8）酚酞溶液（5g/L）：称取0.5g酚酞溶于100mL体积分数为95%的乙醇中。

9）次甲基蓝溶液（10g/L）：称取1g次甲基蓝于100mL水中。

3.操作步骤

（1）斐林溶液的标定

1）称取在105℃±2℃烘箱中干燥2h的蔗糖约0.2g（精确到0.1mg），用50mL水溶解并洗入100mL容量瓶中，加水10mL，再加入10mL盐酸，置于75℃水浴锅中，时时摇动，使溶液温度在67.0～69.5℃，保温5min，冷却后，加2滴酚酞溶液，用氢氧化钠溶液调至微粉色，用水定容至刻度。

2）预滴定：吸取10mL斐林氏液（甲、乙液各5mL）置于250mL锥形瓶中，加入20mL蒸馏水，放入几粒玻璃珠，从滴定管中放出15mL样液置于锥形瓶中，置于电炉上加热，使其在2min内沸腾，保持沸腾状态15s，加入3滴次甲基蓝溶液，继续滴入样液至溶液蓝色完全退尽为止，读取所用样液的体积。

3）精确滴定：另取10mL斐林氏液（甲、乙液各5mL）置于250mL锥形瓶中，再加入20mL蒸馏水，放入几粒玻璃珠，加入比预滴定量少0.5～1.0mL的样液，置于电炉上，使其在2min内沸腾，维持沸腾状态2min，加入3滴次甲基蓝溶液，以每2s一滴的速度徐徐滴入样液，溶液蓝色完全退尽即为终点，记录消耗样液的体积。

4）按式（2-3-19）和式（2-3-20）计算斐林溶液的蔗糖校正值（f）。

式中 A——实测转化糖数（mg）；

V——滴定时消耗蔗糖溶液的体积（mL）；

m——称取蔗糖的质量（g）；

0.95——果糖相对分子质量和葡萄糖相对分子质量之和与蔗糖相对分子质量的比值；

f——斐林溶液的蔗糖校正值；

AL——由蔗糖溶液滴定的毫升数查表2-3-13所得的转化糖数（mg）。(www.xing528.com)

表2-3-13 乳糖及转化糖因数表（10mL斐林溶液）

注：“因数”是指与滴定量相对应的数目，可自表中查得。若蔗糖含量与乳糖含量的比超过3∶1时，则应加表2-3-14中的校正值后计算。

表2-3-14 乳糖滴定量校正值数

（2）测定 取50mL样液置于100mL容量瓶中，加水10mL，再加入10mL盐酸，置于75℃水浴锅中，时时摇动，使溶液温度在67.0～69.5℃，保温5min，冷却后，加2滴酚酞溶液，用氢氧化钠溶液调至微粉色，用水定容至刻度，再按斐林溶液的标定中预滴定和精确滴定的方法操作。

4.结果计算

利用测定乳糖时的滴定量，按式（2-3-21）计算出相对应的转化前转化糖的含量X₁。

式中 X₁——转化前转化糖的含量（g/100g）；

F₂——由测定乳糖时消耗样液的毫升数查表1所得转化糖数（mg）；

f₂——斐林溶液蔗糖校正值；

V₁——滴定消耗滤液量（mL）；

m——样品的质量（g）。

用测定蔗糖时的滴定量，按式（2-3-22）计算出相对应的转化后转化糖的含量X₂。

式中 X₂——转化后转化糖的含量（g/100g）；

F₃——由滴定消耗的转化液量查得的转化糖数（mg）；

f₂——斐林溶液蔗糖校正值；

m——样品的质量（g）；

V₂——滴定消耗的转化液量（mL）。

试样中蔗糖的含量X按式（2-3-23）计算。

X=（X₂-X₁）×0.95 （2-3-23）

式中 X——试样中蔗糖的含量（g/100g）；

X₁——转化前转化糖的含量（g/100g）；

X₂——转化后转化糖的含量（g/100g）。

结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留三位有效数字。