如何测定植物油脂羰基价？

1.原理

油脂在氧化酸败时会产生许多羰基化合物（醛、酮等）。这些化合物中的羰基都可与2，4-二硝基苯肼反应，生成物在碱性溶液中形成红褐色或酒红色，在440nm处测定其吸光度，计算羰基价。

2.仪器与试剂

（1）仪器 实验室常规仪器、分光光度计。

（2）试剂

1）精制乙醇：取1000mL无水乙醇，置于2000mL圆底烧瓶中，加入5g铝粉、10g氢氧化钾，接好标准磨口的回流冷凝管，于水浴中加热回流1h，然后用全玻璃蒸馏装置蒸馏并收集蒸馏液。

2）精制苯：取500mL苯，置于1000mL分液漏斗中，加入50mL硫酸，小心振摇5min（开始振摇时注意放气），静置分层，弃除硫酸层，再加50mL硫酸重复处理一次，将苯层移入另一支分液漏斗，用水洗涤三次，然后经无水硫酸钠脱水，用全玻璃蒸馏装置蒸馏并收集蒸馏液。

3）2，4-二硝基苯肼溶液：称取50mg2，4-二硝基苯肼，溶于100mL精制苯中。

4）三氯乙酸溶液：称取4.3g固体三氯乙酸，加100mL精制苯溶解。

5）氢氧化钾-乙醇溶液：称取4g氢氧化钾，加100mL精制乙醇使其溶解，置于冷暗处过夜，取上部澄清液使用。若溶液变为黄褐色，则应重新配制。

3.操作步骤

精密称取0.025～0.5g试样，置于25mL容量瓶中，加苯溶解试样并稀释至刻度，从中吸取5.0mL，置于25mL具塞试管中，加3mL三氯乙酸溶液及5mL2，4-二硝基苯肼溶液，仔细振摇混匀，然后在60℃水浴中加热30min，冷却后，沿试管壁慢慢加入10mL氢氧化钾-乙醇溶液，使其成为二液层，将试管塞好，剧烈振摇混匀，放置10min，以1cm比色杯，用试剂空白调节零点，于波长440nm处测吸光度。

4.结果计算

试样的羰基价按式（2-3-7）计算。

式中 X——试样的羰基价（meq/kg）；

A——测定时样液的吸光度；

m——试样质量（g）；

V₁——试样稀释后的总体积（mL）；

V₂——测定用试样稀释液的体积（mL）；(www.xing528.com)

854——各种醛的毫克当量吸光系数的平均值。

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过其算术平均值的5%。求其平均数，即为测定结果，保留三位有效数字。

5.注意事项

目前，羰基化合物的测定方法有油脂总羰基直接定量和挥发性或游离羰基分离定量两种方法。挥发性或游离羰基分离定量可采用蒸馏法或柱色谱法。在国家标准中，采用总羰基直接定量法测定羰基价。

通常随着油脂储存时间的增加和不良条件的影响，羰基价呈不断增高的趋势。它与油脂酸败劣变密切相关。

本试验所有试剂都必须精制后方能使用。当空白试管的吸收值超过0.20时，表明试验所用试剂的纯度不符合要求。油样的过氧化值较高时会影响测试结果，建议样品最好先去除过氧化物。

式中 X——试样的羰基价（meq/kg）；

A——测定时样液的吸光度；

m——试样质量（g）；

V₁——试样稀释后的总体积（mL）；

V₂——测定用试样稀释液的体积（mL）；

854——各种醛的毫克当量吸光系数的平均值。

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过其算术平均值的5%。求其平均数，即为测定结果，保留三位有效数字。

5.注意事项

目前，羰基化合物的测定方法有油脂总羰基直接定量和挥发性或游离羰基分离定量两种方法。挥发性或游离羰基分离定量可采用蒸馏法或柱色谱法。在国家标准中，采用总羰基直接定量法测定羰基价。

通常随着油脂储存时间的增加和不良条件的影响，羰基价呈不断增高的趋势。它与油脂酸败劣变密切相关。

本试验所有试剂都必须精制后方能使用。当空白试管的吸收值超过0.20时，表明试验所用试剂的纯度不符合要求。油样的过氧化值较高时会影响测试结果，建议样品最好先去除过氧化物。