胞内抗体在肿瘤基因治疗和艾滋病应用中的前景

一般抗体在细胞内合成后分泌到细胞外。在抗体基因的N端或C端加入引导序列能使其表达定位于亚细胞部位，如细胞核、细胞质、线粒体、内质网等。这种在细胞内合成并作用于细胞内组分的抗体称为胞内抗体（intracellular antibody，intrabody）。胞内抗体通常在非淋巴细胞内表达，可以特异性干扰靶分子的活性或阻断加工、分泌过程，也可在细胞内抑制病毒复制或抑制生长因子受体及癌基因表达，是一类新型工程抗体。

尽管胞内抗体能够以不同的形式表达，但最常见的是scFv和Fab形式。针对不同的目的，对scFv蛋白的N端或C端进行一些修饰，就可将scFv蛋白人为地滞留于各个亚细胞区室中。将来源于SV40大T抗原的核定位信号（NLS）或TAT核仁前导序列信号同C端连接，可以制成核滞留型或核仁滞留型胞内抗体。在N端融合一段导肽或在C端引入一段内质网滞留信号（KDEL），可使scFv蛋白滞留于内质网。因为内质网是多种生物活性蛋白加工、分泌的通路，将抗体滞留于内质网管腔或内膜上，大大增加了抗体与靶蛋白相互作用的机会。

胞内抗体可在肿瘤细胞特定的亚细胞器中表达并且靶向抗原底物，进而应用于肿瘤基因治疗。目前研究较多的靶蛋白主要包括表皮生长因子受体超家族（EGFR、ErbB-2、ErbB-3、ErbB-4）、白介素-2受体、Ras蛋白、叶酸受体、抑癌蛋白p53、Bcl-2蛋白、c-Myb蛋白以及Ⅳ型胶原酶等与肿瘤的发生及发展各个阶段密切相关的重要蛋白。(www.xing528.com)

胞内抗体在艾滋病的基因治疗中有广泛的应用前景。它作用于病毒结构蛋白、调节蛋白、酶蛋白，并在特定细胞器与靶结构结合并抑制病毒生长周期不同阶段的功能，而这些靶结构都是HIV-1生存、繁殖的必需结构。例如，HIV-1包膜糖蛋白是作为gp160前体合成的，并在高尔基体内分裂为成熟的gp120/41蛋白。gp120与未感染细胞的CD4受体的相互作用对病毒感染，CD4+T细胞耗竭、功能失调和CD4介导的细胞信号破坏都有重要作用，这将有助于对艾滋病的发病机制的研究。胞内抗体scFv105可以在内质网结合gp160前体从而阻止其向细胞表面的转运，导致病毒颗粒不具备感染力。在HIV-1感染的细胞内，胞内抗体Fab105与gp160前体结合并抑制其加工整合，产生弱或无感染力的病毒颗粒。此外，分泌到细胞外的Fab105可以中和细胞外游离的病毒颗粒，保护未被感染的细胞。

尽管胞内抗体在一些疑难疾病的治疗方面显示了良好的应用前景，但它真正用于疾病治疗还存在一些问题：如抗靶分子的抗体基因如何导入特定的组织细胞内；胞内抗体基因在细胞内能不能持久、稳定地表达以达到足够的细胞内浓度；胞内抗体的毒性和免疫原性问题；如何增加胞内抗体的正确折叠、保持生物活性、延长血中半衰期；如何获得大量有治疗价值的胞内抗体等。这些问题的解决还有待于进一步的基础和临床研究。