重组蛋白：血管内皮生长因子受体-Fc融合

年龄相关性黄斑变性（age-related macular degeneration，AMD）又称老年黄斑变性（senile macular degeneration，SMD），为视网膜黄斑区结构的衰老性改变，多发生于40岁以上，发病率随年龄增长而增高，主要症状为由视网膜色素上皮细胞和视网膜退行性病变引起的不可逆的视力下降或丧失。临床根据有无脉络膜新生血管（choroidal neovascularization，CNV）分为干性（萎缩性）和湿性（渗出性）AMD两种，湿性AMD是引起视力严重丧失的原因。CNV发生与发展过程中，血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和其他多种细胞因子及其信号转导通路参与调控，其中，VEGF发挥着关键的作用。因此通过抑制VEGF来对抗CNV的生长，是湿性AMD的一个重要治疗策略。

VEGF家族及其受体在血管生成过程中发挥重要作用，其家族有7个成员，分别是VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、VEGF-F和胎盘生长因子（placenta growth factor，PLGF）；其受体包括酪氨酸激酶受体［VEGFR-1（fms-like tyrosine kinase 1，Flt-1）、VEGFR-2（KDR）、VEGFR-3］和非酪氨酸激酶受体［NRP-1（neuropilin-1）、NRP-2］。其中，VEGF-A是对血管生成影响最大的一种因子，主要与VEGFR-1、VEGFR-2结合发挥作用。将VEGFR-1胞外区第2个类免疫球蛋白结构域（VEGFR-1D2）、VEGFR-2胞外区第3个类免疫球蛋白结构域（VEGFR-2D3）与人的免疫球蛋白IgG1的Fc片段的基因相连，重组表达融合蛋白rhVEGFR-Fc。也有实验室在VEGFR-2D3后面串接VEGFR-2D4，或者采取其他组合方式构建不同的融合蛋白；还有实验室将IgG1的Fc片段以IgG2、IgG3或IgG4的Fc片段予以代替。这类融合蛋白均可以非常好地结合VEGF家族成员，竞争性抑制其与VEGF家族受体结合，阻止家族受体的激活，有效控制新生血管的生成，达到治疗湿性AMD的作用，只是不同组合方式的融合蛋白对VEGFR的亲和力有一定差别。图2-26为部分融合蛋白表达基因序列示意图。这类融合蛋白药物还具有治疗糖尿病黄斑水肿（diabetic macular edema，DME）、病理性近视（pathologic myopia，PM）、视网膜静脉阻塞（retinal vein occlusion，RVO）等相关疾病的疗效。

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图2-26　部分重组人VEGFR-IgG Fc融合蛋白结构示意图

注：（a）基因序列；（b）序列1表达融合蛋白结构。

目前上市品种为采用CHO细胞表达系统生产的注射液剂型，常用辅料有枸橼酸、蔗糖、精氨酸、聚山梨酯20等。规格为10 mg/mL，每支0.2 mL。要求在有资质的医院中使用。医院应具备该疾病诊断和治疗所需的相关仪器设备和条件，由受过玻璃体腔内注射技术培训的有眼科资质的医师进行操作。给药方案一般为初始3个月，每个月玻璃体腔内给药1次，每只眼睛每次0.5 mg（相当于0.05 mL的注射量），之后每3个月玻璃体腔内给药1次。治疗期间应关注患者视力变化情况，根据眼科医师的评估确定后续治疗方案。最常见的不良反应为注射部位出血、结膜充血和眼内压增高，均由玻璃体腔内注射引起，且程度较轻，大多数无须治疗即可恢复。