糖是食品的重要成分之一，也是一些食品（比如蜂蜜）的最主要组成成分。蜂蜜中糖分以单糖为主，双糖次之，还含有少量三糖及低聚糖。蜂蜜中糖分的质量分数为69%～86%，其中果糖的质量分数为32%～46%、葡萄糖的质量分数为25%～37%、蔗糖的质量分数为0%～5%。由于各种糖含量的测定比较困难，因此目前食品中涉及糖的项目多以还原糖或总糖来表示。测定食品中还原糖和总糖的最常用方法有碱性酒石酸铜直接滴定法和高锰酸钾滴定法。它们都是利用糖的还原性进行测定的，结果只能笼统地以还原糖或总糖表示，不具备选择性，并不能给出各种糖的具体含量，无法满足检测指标日趋细化的要求。
《食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定 高效液相色谱法》（GB/T 22221—2008）采用高效液相色谱法同时分离并检测食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的含量。
1.原理
试样经沉淀蛋白质和萃取脂肪后过滤，样液进高效液相色谱仪，经氨基分离柱分离，用外标法定量。
2.试剂与仪器
（1）试剂 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，试验用水为GB/T 6682—2008规定的一级水。
1）乙腈：色谱纯。
2）乙酸锌溶液（219g/L）：称取21.9g乙酸锌[Zn（CH3COO）2·2H2O]，加入3mL冰乙酸，用水溶解并稀释至100mL。
3）亚铁氰化钾溶液（106g/L）：称取10.6g亚铁氰化钾[K4Fe（CN）6·3H2O]，用水溶解并稀释至100mL。
4）石油醚：沸程为30～60℃。
5）糖：纯度大于或等于99%。
6）糖标准储备液：分别称取1g（精确至0.1mg）经96℃±2℃干燥2h的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖标准品，加入约50g水溶解，称量（精确至0.1mg），溶液每克分别相当于20mg果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖，于4℃密封放置，可储存一个月。
7）糖标准工作液：分别准确吸取糖标准储备液1.00mL、2.00mL、3.00mL、5.00mL，置于10mL容量瓶，称量（精确至0.1mg），加水至刻度线，称量（精确至0.1mg），分别相当于2.0mg/g、4.0mg/g、6.0mg/g、10.0mg/g的标准溶液。
（2）仪器 实验室常规仪器和以下各项：
1）高效液相色谱仪：配示差折光检测器或相当的检测器。
2）色谱柱：氨基色谱柱（内径为4.6mm，长度为250mm，粒度为5μm）。
3）磁力搅拌器。
4）离心机：4000r/min。
3.试样的制备
1）块状或颗粒状样品：取有代表性的样品至少200g，用粉碎机粉碎，置于密闭的容器中。
2）粉末状、糊状或液体样品：取有代表性的样品至少200g，充分混匀，置于密闭的容器中。
4.分析步骤
（1）样品的处理
1）脂肪含量小于10%（质量分数）的食品：称取均匀的食品样品0.5～10g（m1，精确至0.1mg），具体为糖的质量分数在5%以下的称取10g，糖的质量分数为5%～10%的称取5g，糖的质量分数为10%～40%的称取2g，糖的质量分数在40%以上的称取0.5g，置于150mL带有磁力搅拌子的烧杯中，加水约50g溶解，缓慢加入乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液各5mL，再加水至溶液总质量为100g（精确至0.1mg），磁力搅拌30min，冷至室温后，用干燥滤纸过滤，取约2mL滤液，用0.45μm滤膜过滤或离心取得清液，置于样品瓶中，待色谱仪测定。
2）糖浆、蜂蜜类：称取1～2g均匀样品（m1，精确至0.1mg）置于50mL容量瓶，加水至溶液总质量约为50g（m2，精确至0.1mg），充分摇匀，用0.45μm滤膜过滤或离心取得清液，置于样品瓶中，待色谱仪测定。
3）含二氧化碳的饮料：吸取除去了二氧化碳的样品50mL（m1），移入100mL容量瓶中，缓慢加入乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液各5mL，放冷至室温后，用水定容至刻度（m2），摇匀，静置30min，然后用干燥滤纸过滤，取约2mL滤液，用0.45μm滤膜过滤或离心取得清液，置于样品瓶中，待色谱仪测定。(www.xing528.com)
4）脂肪含量大于10%（质量分数）的食品：称取均匀的样品5～10g（m1，精确至0.1mg），置于100mL具塞离心管中，加入50mL石油醚，振摇2min，以1800r/min的转速离心15min，去除石油醚，重复上述步骤至去除大部分脂肪。蒸发残留的石油醚，用玻璃棒将样品捣碎，将样品转移至150mL带有磁力搅拌子的烧杯中，用50g水分两次冲洗离心管，将洗液并入烧杯中，以下按1）中自“缓慢加入乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液各5mL”起操作。
（2）测定
1）高效液相色谱检测样品参考条件
①柱温：40℃。
②流动相：（85+15）乙腈-水溶液。
③流速：1.0mL/min。
④进样体积：20μL。
2）标准曲线的绘制：分别吸取20μL标准工作液，注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件下测定标准溶液的响应值（峰面积），以含量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
3）样品中糖的测定：吸取20μL样液注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件下测定试样的响应值（峰面积），由标准曲线上查得样液中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的含量，或利用回归方程计算样液中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的含量。
5.结果计算
样品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的含量（以质量分数计）按式（7-7-10）计算。
式中 X——样品中糖（果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖）的含量；
c——样液中糖的含量（mg/g）；
m2——水溶液的总质量或体积（g或mL）；
m1——样品的质量或体积（g或mL）。
平行测定结果用算术平均值表示，保留三位有效数字。同一样品独立进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
6.试验说明
示差折光检测器对温度敏感，因此在进行糖的测定时，应严格控制温度条件，以保证试验结果的准确性。
式中 X——样品中糖（果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖）的含量；
c——样液中糖的含量（mg/g）；
m2——水溶液的总质量或体积（g或mL）；
m1——样品的质量或体积（g或mL）。
平行测定结果用算术平均值表示，保留三位有效数字。同一样品独立进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
6.试验说明
示差折光检测器对温度敏感，因此在进行糖的测定时，应严格控制温度条件，以保证试验结果的准确性。
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