测定食品中有机磷农药残留量的方法

有机磷农药作为高效、广谱的杀虫剂和除草剂被广泛应用于农业生产中。它是我国目前使用量最大的一类农药，如甲胺磷、乐果、敌敌畏、对硫磷等。其特点是：化学性质不稳定，在自然界中易分解，在生物体内易分解；容易在植物性食品，尤其是水果、蔬菜中残留，其残留量高，残留时间长；通过食物链在人体累积会引起致畸、致癌、致突变等危害。

因此，加强对有机磷农药检测方法的研究，特别是灵敏、准确、简便的检测方法，对保护生态环境，保障人类健康有着重要的意义。《食品中有机磷农药残留量的测定》（GB/T 5009.20—2003）为我国现行的食品中有机磷农药残留量测定的国家标准测，现就其中的第一法进行介绍。

1.原理

含有机磷的试样在富氢焰上燃烧，以HPO碎片的形式放射出波长为526nm的特性光。这种光通过滤光片选择后，由光电倍增管接收，转换成电信号，经微电流放大器放大后被记录下来。将试样的峰面积或峰高与标准品的峰面积或峰高进行比较定量。

2.试剂

（1）化学品 丙酮、二氯甲烷、氯化钠、无水硫酸钠、助滤剂Celite 545。

（2）农药标准品

敌敌畏（DDVP） 纯度≥99%

甲拌磷（phorate） 纯度≥98%

二嗪磷（diazinon） 纯度≥98%

甲基嘧啶磷（pirimiphos-methyl） 纯度≥99%

稻瘟净（kitazine） 纯度≥99%

氧化喹硫磷（po-quinalphos） 纯度≥99%

甲喹硫磷（methdathion） 纯度≥99.6%

乙硫磷（ethion） 纯度≥95%

喹硫磷（quinaphos） 纯度≥98.2%

杀螟硫磷（fenitrothion） 纯度≥98.5%

久效磷（monocrotophos） 纯度≥99%

巴胺磷（propetumphos） 纯度≥99%

乙嘧硫磷（etrimfos） 纯度≥97%

甲基对硫磷（parathion-methyl） 纯度≥99%

水胺硫磷（isocarbophos） 纯度≥99%

稻丰散（phenthoate） 纯度≥99.6%

克线磷（phenamiphos） 纯度≥99.9%

乐果（dimethoate） 纯度≥99.0%

对硫磷（parathion） 纯度≥99.0%

速灭磷（mevinphos） 顺式纯度≥60%，反式纯度≥40%

（3）农药标准溶液的配制 分别准确称取上述农药标准品，用二氯甲烷作溶剂，分别配制成1.0mg/mL的标准储备液，储于冰箱（4℃）中。使用时根据各农药品种的仪器响应情况，吸取不同量的标准储备液，用二氯甲烷稀释成混合标准使用液。

3.仪器

组织捣碎机、粉碎机、旋转蒸发仪、气相色谱仪（附有火焰光度检测器）。

4.试样的制备

取粮食试样用粉碎机粉碎，过20目筛制成粮食试样；水果、蔬菜试样去掉非可食部分后制成待分析试样。

5.分析步骤(www.xing528.com)

（1）提取

1）水果、蔬菜：称取50.00g试样，置于300mL烧杯中，加入50mL水和100mL丙酮（提取液总体积为150mL），用组织捣碎机提取1～2min。匀浆液经铺有两层滤纸和约10g Celite 545的布氏漏斗减压抽滤。取滤液100mL，移至500mL分液漏斗中。

2）谷物：称取25.00g试样，置于300mL烧杯中，加入50mL水和100mL丙酮，以下步骤同水果、蔬菜的提取。

（2）净化 向上述滤液中加入10～15g氯化钠，使溶液处于饱和状态，猛烈振摇2～3min，静置10min，使丙酮与水相分层，水相用50mL二氯甲烷振摇2min，再静置分层。将丙酮与二氯甲烷提取液合并，用装有20～30g无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水滤入250mL圆底烧瓶中，再以约40mL二氯甲烷分数次洗涤容器和无水硫酸钠，将洗涤液也并入烧瓶中，用旋转蒸发器浓缩至约2mL，将浓缩液定量转移至5～25mL容量瓶中，加二氯甲烷定容至刻度。

（3）气相色谱测定 色谱参考条件如下：

1）色谱柱

①玻璃柱2.6m×3mm（i.d），填装涂有4.5%DC-200+2.5%OV-17的Chromosorb W AW-DMCS（80～100目）的担体。

②玻璃柱2.6m×3mm（i.d），填装涂有质量分数为1.5%QF-1的Chromosorb W AW-DMCS（60～80目）。

③气体速度：氮气为50mL/min，氢气为100mL/min，空气为50mL/min。

2）温度：柱箱温度为240℃，汽化室温度为260℃，检测器温度为270℃。

（4）测定 吸取2～5μL混合标准液及试样净化液注入色谱仪中，以保留时间定性，以试样的峰高或峰面积与标准比较定量。

6.结果计算

式中 X_i——i组分有机磷农药的含量（mg/kg）；

A_i——试样中i组分的峰面积（积分单位）；

A_si——混合标准液中i组分的峰面积（积分单位）；

V₁——试样提取液的总体积（mL）；

V₂——净化用提取液的总体积（mL）；

V₃——浓缩后的定容体积（mL）；

V₄——进样体积（μL）；

E_si——注入色谱仪中的i标准组分的质量（ng）；

m——试样的质量（g）。

计算结果保留两位有效数字。

7.精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。

8.试验说明

（1）16种有机磷农药的色谱图 如图7-6-1所示。

图7-6-116 种有机磷农药的色谱图

1—敌敌畏最低检测含量为0.005mg/kg 2—速灭磷最低检测含量为0.004mg/kg 3—久效磷最低检测含量为0.014mg/kg 4—甲拌磷最低检测含量为0.004mg/kg 5—巴胺磷最低检测含量为0.011mg/kg 6—二嗪磷最低检测含量为0.003mg/kg 7—乙嘧硫磷最低检测含量为0.003mg/kg 8—甲基嘧啶磷最低检测含量为0.004mg/kg 9—甲基对硫磷最低检测含量为0.004mg/kg 10—稻瘟净最低检测含量为0.004mg/kg 11—水胺硫磷最低检测含量为0.005mg/kg 12—氧化喹硫磷最低检测含量为0.025mg/kg 13—稻丰散最低检测含量为0.017mg/kg 14—甲喹硫磷最低检测含量为0.014mg/kg 15—克线磷最低检测含量为0.009mg/kg 16—乙硫磷最低检测含量为0.014mg/kg

（2）13种有机磷农药的色谱图（见图7-6-2）。

本方法适用于使用过敌敌畏等二十种农药制剂的水果、蔬菜、谷类等作物的残留量分析。