食品中甜蜜素的测定方法优化

甜蜜素的化学名称为环己基氨基磺酸钠，属于非营养型合成甜味剂，甜度是蔗糖的30～40倍。但甜蜜素不似糖精，用量稍多时会有苦味。它是国际通用的食品添加剂，被用在清凉饮料、果汁、冰激凌、糕点及蜜饯等食品中。但是，若经常食用甜蜜素含量超标的饮料或其他食品，会对人体肝脏和神经系统造成危害，特别是对代谢排毒能力较弱的老人、孕妇、小孩危害更明显。根据《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》（GB 2760—2011）的规定，甜蜜素可以作为甜蜜素甜味剂，其使用范围为：冷冻饮品（食用冰除外）、水果罐头、腌制的蔬菜、腐乳类、配制酒、果冻、糕点、饼干、面包、复合调味料、饮料类（包装饮用水类除外）等，其最大使用量为0.65g/kg；蜜饯凉果、果酱，最大使用量为1.0g/kg；凉果类、话化类（甘草制品）、果丹（饼）类等，最大使用量为8.0g/kg；带壳熟制坚果及籽类，最大使用量为6.0g/kg；脱壳熟制坚果及籽料，最大使用量为1.2g/kg。下面介绍《食品中环己基氨基磺酸钠的测定》（GB 5009.97—2003）中的气相色谱法（第一法）。

1.原理

在硫酸介质中环己基氨基磺酸钠与亚硝酸反应，生成环己醇亚硝酸酯，利用气相色谱法进行定性和定量。

2.试剂

（1）常用试剂 正己烷、氯化钠、层析硅胶（或海砂）。

（2）亚硝酸钠溶液（50g/L） 50g亚硝酸钠溶解于1000mL蒸馏水中。

（3）硫酸溶液（100g/L） 移取55mL浓硫酸（ρ=1.84g/cm³），缓慢注入蒸馏水中，并不断搅拌，待溶液冷却后，稀释定容至1000mL。

（4）环己基氨基磺酸钠标准溶液 精确称取1.0000g环己基氨基磺酸钠，加水溶解并定容至100mL。此溶液每毫升含环己基氨基磺酸钠10mg。

3.仪器

1）气相色谱仪：附氢火焰离子化检测器（FID）。

2）旋涡混合器。

3）离心机。

4）10μL微量注射器。

5）色谱条件

①色谱柱：长度为2m，内径为3mm，U形不锈钢柱。

②固定相：Chromosorb W AW-DMCS（80～100目），涂以10%SE-30。

③测定条件：柱温为80℃，汽化温度为150℃，检测温度为150℃；流速，氮气为40mL/min，氢气为30mL/min，空气为300mL/min。

4.试样的处理

（1）液体试样 摇匀后直接称取。含二氧化碳的试样应先加热除去二氧化碳；含酒精的试样应加40g/L氢氧化钠溶液调至碱性，于沸水浴中加热除去酒精，制成试样。

（2）固体试样 对于凉果、蜜饯类试样，应将其剪碎制成试样。(www.xing528.com)

5.分析步骤

（1）试样的制备

1）液体试样：称取20.0g试样，置于100mL带塞比色管，然后将比色管置于冰浴中。

2）固体试样：称取2.0g已剪碎的试样置于研钵中，加少许层析硅胶（或海砂）研磨至呈干粉状，经漏斗倒入100mL容量瓶中，加水冲洗研钵，并将洗液一并转移至容量瓶中，加水至刻度，不时摇动，1h后过滤，即得试样。准确吸取20mL试样置于100mL带塞比色管，然后将比色管置于冰浴中。

（2）测定

1）标准曲线的绘制：准确吸取1.00mL环己基氨基磺酸钠标准溶液，置于100mL带塞比色管中，加水20mL，置于冰浴中，然后加入50g/L的亚硝酸钠溶液5mL和100g/L的硫酸溶液5mL，摇匀，在冰浴中放置30min，并经常摇动，再准确加入10mL正己烷和5g氯化钠，摇匀后置于旋涡混合器上振动1min（或振摇80次），待静止分层后吸出己烷层，置于10mL带塞离心管中进行离心分离，每毫升己烷提取液相当于1mg环己基氨基磺酸钠。将标准提取液进样1～5μL于气相色谱仪中，根据响应值绘制标准曲线。

2）对试样管按1）中自“加入50g/L的亚硝酸钠溶液5mL”起进行操作，然后将试样同样进样1～5μL，测得响应值，从标准曲线上查出相应的含量。

6.结果计算

式中 X——试样中环己基氨基磺酸钠的含量（g/kg）；

m——试样质量（g）；

V——进样体积（μL）；

10——正己烷加入量（mL）；

m₁——测定用试样中环己基氨基磺酸钠的质量（μg）。

计算结果保留两位有效数字。

7.精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

8.试验说明

1）本方法适用于饮料、凉果等食品中环己基氨基磺酸钠的测定。

2）本标准检出限为4μg。