水产品中组胺测定方法

水产品中的组胺是组胺酸在莫根氏变形杆菌、组胺无色杆菌的组胺酸脱羧酶的作用下，脱去羧基后形成的一种胺类物质。人体摄入一定量的组胺后，会引起组胺中毒。我国的水产品管理办法规定：青皮红肉的鱼类，如金枪鱼（鲔鱼）、鲭色、鲐鱼、秋刀鱼、鲤鱼、沙丁鱼、鲥鱼等，易分解产生大量组胺，出售时应注意鲜度质量。水产品中组胺的测定常用比色法。

1.原理

鱼体中组胺用正戊醇提取，遇偶氮试剂显橙色，与标准系列比较定量。

2.试剂

1）常用试剂：正戊醇、100g/L三氯乙酸溶液、50g/L碳酸钠溶液、250g/L氢氧化钠溶液、（1+11）盐酸。

2）组胺标准储备液：准确称取02767g于100℃±5℃干燥2h的磷酸组胺，溶于水，移入100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于1.0mg组胺。

3）磷酸组胺标准使用液：吸取1.0mL组胺标准储备液，置于50mL容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于20.0μg组胺。

4）偶氮试剂

甲液：称取0.5g对硝基苯胺，加5mL盐酸溶解后，再加水稀释至200mL，于冰箱中保存。

乙液：亚硝酸钠溶液（5g/L），临用时现配。

吸取甲液5mL、乙液40mL混合后立即使用。

3.样品的处理(www.xing528.com)

称取5.00～10.00g绞碎并混合均匀的试样，置于具塞锥形瓶中，加入15～20mL 100g/L三氯乙酸溶液，浸泡2～3h，过滤。吸取2.0mL滤液，置于分液漏斗中，加250g/L氢氧化钠溶液使其呈碱性，每次加入3mL正戊醇，振摇5min，提取3次，合并正戊醇并稀释至10.0mL。吸取2.0mL正戊醇提取液置于分液漏斗中，每次加3mL（1+11）盐酸，振摇提取3次，合并盐酸提取液，稀释至10.0mL备用。

4.测定

吸取2.0mL上述盐酸提取液置于10mL比色管中，另吸取0mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.0mL组胺标准使用液（相当于0μg、4μg、8μg、12μg、16μg、20μg组胺），分别置于10mL比色管中，加水至1mL，再各加1mL（1+11）盐酸、3mL 50g/L碳酸钠溶液、3mL偶氮试剂，加水至刻度，混匀，放置10min后用1cm比色皿以零管调节零点，于480nm波长处测吸光度，绘制标准曲线比较定量。

5.结果计算

试样中组胺的含量按式（7-3-13）计算。

式中 X——试样中组胺的含量（mg/100g）；

V——加入100g/L三氯乙酸溶液的体积（mL）；

m₁——由标准曲线查得或由回归方程算得测定时试样处理液中组胺的质量（μg）；

m——试样质量（g）。

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。