【摘要】：尿素酶不是诱导酶，因为不论底物尿素是否存在，细菌均能合成此酶。其活性最适宜的pH值为7.0。图6-3-2 尿素酶试验三、甲基红试验试验原理 肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖的过程中产生丙酮酸，在进一步分解时，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸、琥珀酸、乙酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基的pH值下降至4.5以下，使甲基红指示剂变红。甲基红为酸性指示剂，pH值范围为4.4～6.0，其pK值为5.0。
（1）试验原理 有些细菌能产生尿素酶，将尿素分解，产生2个分子的氨，使培养基变为碱性，酚红呈粉红色。尿素酶不是诱导酶，因为不论底物尿素是否存在，细菌均能合成此酶。其活性最适宜的pH值为7.0。
（2）试验方法 挑取大量18～24h待试菌培养物接种于3支液体培养基管中，摇匀，于36℃±1℃培养分别10min、60min和120min，观察结果；或涂布并穿刺接种于琼脂斜面，不要到达底部，留底部作变色对照，分别培养2h、4h和24h，观察结果。若为阴性则应继续培养至4天，作最终判定，变为粉红色为阳性，如图6-3-2所示。
图6-3-2 尿素酶试验
三、甲基红（MR）试验(www.xing528.com)
（1）试验原理 肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖的过程中产生丙酮酸，在进一步分解时，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸、琥珀酸、乙酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基的pH值下降至4.5以下，使甲基红指示剂变红。
（2）试验方法 挑取少许新的待试纯培养物，接种于MR-VP生化鉴定管，于36℃±1℃或30℃（以30℃为好）培养3～5天，从第二天起，每日取培养液1mL，加甲基红指示剂1～2滴，呈鲜红色为阳性，呈淡红色为弱阳性，黄色为阴性。若发现呈阳性或至第5天仍为阴性，即可判定结果，如图6-3-3所示。甲基红为酸性指示剂，pH值范围为4.4～6.0，其pK值为5.0。故pH＜5.0时，随着酸度的增大而黄色增强，在pH＞5.0时，随着碱度的增大而黄色增强，在pH=5.0或上下接近时，可能变色不够明显，此时应延长培养时间，重复试验。
图6-3-3 甲基红试验
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