采用分光光度法测定铁强化酱油中含量的实验

一、实验原理与要求

（1）在酸性（pH＜0.5）条件下，五元螯合乙二胺四乙酸铁钠（NaFeEDTA）中的铁完全解离生成游离的Fe³⁺，与显色剂硫氰酸铵发生反应生成红色络合物，在λ=480nm处有最大吸收，这是目前检测铁强化酱油中NaFeEDTA含量的快速方法。

（2）绘制标准曲线，要求r²≥0.99。

（3）测定市售铁强化酱油样品，要求误差≤5%。

二、主要材料和设备

1.药品材料

（1）铁强化酱油（市售）；

（2）NaFeEDTA标准品、硫氰酸铵、丙酮、盐酸、过硫酸铵、甲醇均为分析纯。

2.实验设备

紫外可见分光光度计。

三、方法步骤

（1）NaFeEDTA标准溶液的配制 称取NaFeEDTA标准品200mg（0.0001），置于100mL棕色容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，摇匀，制成浓度为2000μg/mL的NaFeEDTA标准溶液。(www.xing528.com)

（2）显色剂的配制 称取硫氰酸铵150g，置于500mL棕色容量瓶中，加水250mL溶解，加丙酮75mL，加水稀释至刻度，摇匀，避光保存。

（3）标准曲线的绘制 吸取NaFeEDTA标准溶液0.0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mL分别置于10mL容量瓶中，用蒸馏水定容，摇匀。吸取稀释后的不同浓度标准品溶液1.00mL分别置于10mL比色管中，加显色剂1.00mL，加6mol/L盐酸1.00mL，用丙酮溶液稀释至刻度，充分振荡，在A=480nm处测定吸光度A_i，空白试剂为参比，绘制标准曲线。

（4）铁强化酱油样品的测定 取铁强化酱油样品0.60mL于10mL容量瓶中，加75%甲醇溶液定容，醇沉30min后，过滤。取滤液1.00mL置于10mL容量瓶中，加稀盐酸1.00mL，过硫酸铵0.20mL，显色剂1.00mL，用丙酮溶液定容，摇匀，测定吸光度A_样。

四、数据处理

（1）根据铁盐标准溶液的浓度梯度c_i，测定吸光度A_i，以c_i～A_i绘制标准曲线，以r²判定标准曲线。

（2）测定样品的A_样，带入回归方程，求出c_样，再计算铁强化酱油中铁的含量。

五、分析讨论

（1）明确实验中各试剂的用途及其用量对测定结果的影响。

（2）实验中是如何将待测样品中含有的亚铁离子转化为正铁离子的？

（3）请设计实验，测定样品中非NaFeEDTA的铁的含量。