一、实验原理与要求
（1）样品用偏磷酸溶液溶解，经超声波振荡提取、离心、微孔滤膜过滤后，通过钠离子色谱柱分离，再与邻苯二甲醛（OPA）衍生反应，由荧光检测器检测定量。本方法采用GB 5413.13—2010《食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维生素B6的测定》方法，适用于婴幼儿配方食品和乳粉中牛磺酸的测定。
（2）掌握高效液相色谱法测定的基本原理和仪器操作。
（3）同一样品的两次测定值之差不得超过两次测定平均值的5%。
二、主要材料与设备
1.药品材料
（1）强化婴儿奶粉；
（2）牛磺酸标准品、偏磷酸、柠檬酸三钠、苯酚、硝酸、硼酸、氢氧化钾、邻苯二甲醛、甲醇、2-巯基乙醇。
2.实验设备
（1）0.3、0.45μm的微孔滤膜；
（2）钠离子氨基酸分离专用柱、氨基酸柱后反应器、荧光检测器、溶剂泵、积分仪、超声波振荡器。
三、方法步骤(www.xing528.com)
（1）配制牛磺酸标准溶液 精确称取牛磺酸标准品0.100g，用水定容至100mL，再吸1.0mL此溶液至100mL，定容后经0.3mm微孔滤膜过滤，浓度为10mm/mL。
（2）流动相 称取柠檬酸三钠19.6g溶于950mL水中，加入苯酚1mL，用6mol/L的硝酸调pH至3.10～3.25，经0.45mm微孔滤膜过滤。
（3）柱后荧光衍生反应试剂 称取邻苯二甲醛（OPA）0.60g，用10mL甲醇溶解后，加入2-巯基乙醇0.5mL和Brij-350.35g，再加入0.5mol/L的硼酸钾溶液至1000mL，经0.4mm微孔滤膜过滤。
（4）样品的测定 称样（牛磺酸含量不少于5mg），用60mL偏磷酸溶液溶解，移入100mL容量瓶中，超声振荡10～15min，冷至室温后，定容。取样液离心5000r/min、20min，吸上清液10mL，经0.3mm微孔膜过滤，接取中间滤液约1mL作进样用。
（5）色谱条件 流动相流速0.3mL/min，柱温55℃，荧光检测器激发波长338nm，发射波长425nm，灵敏度0.01AUFS。
四、数据处理
式中 c——仪器测进样液的浓度，μg/mL；
m——样品的质量，g。
五、分析讨论
（1）比较不同的牛磺酸测定方法，指出各方法的优缺点。
（2）查阅强化食品质量标准，检测所测定结果是否符合标准要求。
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