使用分光光度法测定木素中邻醌和共轭羰基含量

（一）木素中邻醌含量的测定

1.仪器

紫外-可见分光光度计：波长范围200～600nm。

2.试剂

a.0.1mol/L NaOH溶液；b.1mol/L HCl溶液；c.NaBH₄；d.二氧六环-甲醇溶液（4∶6体积比）；e.10mmol/L Na₂SO₃溶液：在二甲亚砜∶水=1∶1（体积比）溶剂中；f.10mmol/L FeCl₃·6H₂O溶液：在二甲亚砜溶剂中；g.N₂气。

3.木素样品的NaBH₄还原

称取100mg木素样品，溶于4mL乙醇和2mL 0.1mol/L NaOH溶液中，加入40mg NaBH₄和4mL H₂O，通N₂保护，室温下在暗处放置24h，然后将溶液用1mol/L HCl中和到pH4，沉淀后离心分离出木素，用去离子水反复洗涤多次，置于真空干燥箱中干燥。

4.测定步骤

将25mg未经NaBH₄还原的木素样品溶于3.5mL二氧六环-甲醇（4∶6，V/V）溶液中，加入1mL Na₂SO₃溶液（c=10mmol/L，在二甲亚砜∶水为1∶1体积比溶剂中）和0.5mL FeCl₃·6H₂O溶液（c=10mmol/L，在二甲亚砜溶剂中），然后将1mL吡啶缓缓加入到待测液体中，参比溶液含有上述除三氯化铁以外的所有化合物，然后测定此溶液在550nm左右的吸光度。

准确称取用NaBH₄还原后的木素试样25mg，重复上述操作，测定在550nm左右的吸光度。

5.结果计算

式中 A₁——木素样品NaBH₄还原后的吸光度

A₂——木素样品NaBH₄还原前的吸光度

c——木素的浓度，mol/L

a——儿茶酚的摩尔吸光系数，1050L/（mol·cm）(www.xing528.com)

δ——比色皿厚度，cm

（二）木素中共轭羰基含量的测定

1.仪器

紫外-可见分光光度计：波长范围200～500nm。

2.试剂

a.0.03mol/L NaOH溶液；含有0.1mol/L（3.8mg/L）NaBH₄。b.二氧六环-水溶液（4∶1，体积比）。

3.测定步骤

精确称取2mg木素样品，用二氧六环-水溶液（4∶1，体积比）配成10mL溶液。取出2mL置于小试管中，加入1mL含有0.1mol/L（3.8mg/mL）NaBH₄的0.03mol/L NaOH溶液进行还原。另取出2mL试料液加入0.03mol/L NaOH溶液作为参比溶液。分别测定50min、46h还原时间下的还原紫外差示吸收，记录波长为310、342、356和400nm附近的差示吸收值（Δε）。

4.共碳基含量的计算

式中 W和X——醚化木素单元中α和γ共轭羰基的含量，个/C₉

Y和Z——酚型木素单元中α和γ共轭羰基的含量，个/C₉

式中 Δα_γ——还原后木素单位浓度吸收，L/（g·cm）

Δε_γ——还原后木素摩尔浓度吸收，L/（mol·cm）

M_γ——木素单元摩尔质量，g/mol