基于分类学地位的窖泥细菌相对含量分析

古襄阳酒业浓香型白酒窖泥样品中平均相对含量大于1.0%的细菌门如图2-2所示。

图2-2　窖泥中优势细菌门相对含量的比较分析

由图2-2可知，在门水平上，窖泥中的细菌类群主要隶属于Firmicutes（硬壁菌门）、Proteobacteria（变形菌门）、Actinobacteria（放线菌门）和Bacteroidetes（拟杆菌门），其平均相对含量分别为92.02%、2.92%、1.83%和1.28%。古襄阳酒业浓香型白酒窖泥样品中平均相对含量大于1.0%的细菌属如图2-3所示。

由图2-3可知，窖泥中细菌主要隶属于Lactobacillus（乳酸杆菌）、Clostridium（梭菌）、Bacillus（芽孢杆菌）和Thermoactinomyces（高温放线菌属），其平均相对含量分别为77.16%、3.70%、1.64%和1.04%。由此可见，窖泥中细菌类群主要由隶属于Firmicutes（硬壁菌门）的4个属构成，累计相对含量为83.53%。本研究进一步在OTU水平对窖泥中细菌菌群的构成进行了解析，基于OTU水平的Venn图如图2-4所示。

图2-3　窖泥中优势细菌属相对含量的比较分析

图2-4　基于OTU水平的Venn图(www.xing528.com)

由图2-4可知，通过两步UCLUST划分，本研究共得到3807个OTU，虽然核心OTU有241个，仅占OTU总数的6.33%，但其包含了118 950条序列，占所有质控后合格序列数的87.25%。此外，在4个样品中分别出现3次、2次和1次的OTU分别有420个、532个和2614个，分别占OTU总数的11.03%、13.97%和68.66%，其包含的序列数分别为11 839条、2071条和34 68条，分别占所有质控后合格序列数的8.68%、1.52%和2.54%。由此可见，虽然有些浓香型窖池较之其他窖池可能含有一些较为独特的细菌种系型，但其平均含量仅为0.001%。本研究进一步绘制了相对含量大于1.0%的核心OTU在各窖泥样品中相对含量的热图，结果如图2-5所示。

图2-5　相对含量大于1.0%的核心OTU在各窖泥样品中相对含量的热图

注：依据各OTU的相对含量建立了左侧和上方的聚类树

由图2-5可知，在241个核心OTU中，平均相对含量大于1.0%的OTU有8个，其中7个隶属于Lactobacillus（乳酸杆菌），1个隶属于Thermoactinomycetaceae（高温放线菌科）。8个OTU的累计平均相对含量为71.31%，其中均隶属于Lactobacillus（乳酸杆菌）的OTU662和OTU792的平均相对含量为35.01%和16.99%。进一步选取上述8个核心OTU中的代表性序列构建了系统发育树，其结果如图2-6所示。

图2-6　相对含量大于1.0% OTU的系统发育树

由图2-6可知，OTU792、OTU662、OTU4536、OTU2192、OTU2891、OTU2828和OTU2357中的代表性序列可以与Lactobacillus acetotoleran（s耐酸乳杆菌）形成聚类，而OTU4559虽然可被鉴定到Thermoactinomycetaceae（高温放线菌科），但无法将其与某一种细菌形成聚类。