(1)色谱峰的识别
色谱峰的识别一般分三步进行:
第一步是色谱峰形的检出,即判断是否出峰,出峰是否为色谱峰;
第二步是对不正常的出峰进行删除,删去一些不需要的非峰信号,如干扰峰等;
第三步是选择所需要的色谱峰。
色谱峰形的检出主要靠斜率检测电平来识别,当检测到的数次斜率值高于斜率检测电平时即认为是出峰;当斜率值为零时为峰的顶点;而当检测到的数次斜率值小于斜率检测电平时则认为峰结束,如图9.27所示。
对不正常的非峰进行删除,是通过最小峰面积和最小峰高来实现的,当检测到的峰面积或是峰高值小于所设定的最小峰面积和最小峰高时,则不认为是出峰,而作为噪声除去。选择所需要的色谱峰是通过峰窗进行识别,当峰的保留时间在所设定的峰窗范围内,则认为是所需要的色谱峰,不在峰窗范围内的峰则不是需要检测的色谱峰。如图9.28所示。
与色谱峰识别有关的参数及其含义如下:
图9.27 色谱峰形的检出
图9.28 对所需要的色谱峰进行选择
①采样频率(Sampling Rate):采样频率即每秒的采样次数,取值范围为1~48次/s,默认值为16次/s,采样时间为63 ms/次。此设定值和峰宽成反比,峰较宽时,此值可设定较小,采样频率较低,峰较窄时,此值设定较大。
②噪声电平(Noise Level):噪声电平指模拟输入电路产生的噪声电平的允许值,此值用采样码值来表示,其取值范围应该在-32 767~+32 767,仪器默认值为0。此电平值可以手动方式进行测试。当输入信号电平大于此值时,仪器认为是出峰。当输入信号电平小于此值时,仪器不认为是出峰,不进行色谱峰处理,而作为噪声除去。(www.xing528.com)
③斜率检测电平(Gradient):斜率检测电平是色谱峰出峰的判别标识之一,当色谱峰的连续采样斜率高于此值时,被认为是出峰,否则作为基线处理。
斜率检测电平表示的是单位时间内采样的变化值,即两次采样码差值/采样时间的比值。
此设定值一般和采样频率接近,与出峰大小成正比,当想检测较为平滑的峰时,此值可设较小,当出峰较陡较大时,此值可设较大。
④最小峰面积(Minimum Peak Area):主要用来消除一些小的干扰峰,当检测峰的峰面积小于最小峰面积时,则做为干扰峰除去,不进行色谱峰计算。
⑤最小峰高(Minimum Peak Height):用于峰高检测时除去一些小的干扰峰,当检测到的峰的峰高小于最小峰高时,则作为干扰峰除去,不进行色谱峰计算。
(2)峰面积的测量
对于分离较好的色谱峰,测量方法有以下两种:
①数字积分法:采用数据处理装置,用积分法计算峰面积。
②峰高乘半峰宽法:用峰高乘半峰宽计算峰面积A,如图9.29所示。
对于部分重叠的色谱峰,若两峰交点的高度低于小峰的半峰高,仍可用峰高乘半峰宽法。
图9.29 峰高乘半峰宽法计算峰面积
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