分析皂苷类化合物含量的方法与优化

皂苷（saponins）是广泛存在于植物界的一类特殊的苷类，其水溶液经振摇后可产生持久性的泡沫，类似肥皂而得名。皂苷是由皂苷元和糖、糖醛酸或其他有机酸组成。根据其苷元结构，可分为甾体皂苷和三萜皂苷两大类。甾体皂苷的苷元基本骨架为含27个碳原子的螺旋甾烷或其异构体异螺旋甾烷，多以单糖链苷形式存在，极性较大。三萜皂苷由6个异戊二烯以头尾相接或尾尾相接而成。由于其分子结构中常连有羧基，故多为酸性皂苷。

1.紫外-可见光分光光度法

皂苷类成分与强氧化性的强酸试剂（如浓硫酸、高氯酸、醋酐-硫酸或硫酸-冰醋酸、芳香醛-硫酸等）会发生氧化、脱水、脱羧、缩合等反应，生成具有多烯结构的缩合物而呈色，可在紫外-可见光区进行比色测定。这种测定方法一般用于测定样品中总皂苷或总皂苷元的含量。

2.薄层色谱法(www.xing528.com)

皂苷大多无紫外吸收，可经薄层色谱分离后，用适当的显色剂显色，再进行定量分析。薄层色谱法是皂苷类成分定性、定量分析的最常用方法。其中，吸附剂常用硅胶和氧化铝，有时为了分离的需要加入一定的硝酸银。显色剂常用三氯醋酸、氯磺酸-醋酸、浓硫酸或50%及20%硫酸、三氯化锑、磷钼酸、浓硫酸-醋酸酐、碘蒸气等。极性较大的皂苷，一般用分配薄层效果较好。皂苷元极性较小，用吸附薄层或分配薄层均可，具体方法包括薄层扫描法和薄层-比色法。

3.高效液相色谱法

高效液相色谱法测定皂苷类成分的关键在于测定波长和流动相的选择。流动相常用的有乙腈-水和甲醇-水系统。对于有较强紫外吸收的皂苷，可用紫外检测器检测。多数皂苷在紫外区无明显吸收，可采用蒸发光散射检测器（ELSD）进行检测，其优点在于灵敏度高、基线稳定、稳定性好和应用范围广泛，但要注意流动相中不挥发物质对检测的干扰。蒸发光散射检测器通常不允许使用含不挥发盐组分的流动相。