层析技术有很多种,根据不同的标准,可以分成多种类型。
(1)根据流动相的形式进行分类,层析可分为液相层析和气相层析。气相层析是指流动相为气体的层析,而液相层析是指流动相为液体的层析。气相层析测定样品时需要气化,这大大限制了其在食品生化领域的应用,主要用于氨基酸、糖类、脂肪酸、核酸等小分子的分析鉴定;而液相层析是食品生化领域常用的层析形式,适用于样品的分析、分离。
(2)根据固定相基质的形式进行分类,层析可以分为纸层析、薄层层析和柱层析。纸层析是以滤纸作为基质的层析。薄层层析是将基质在玻璃或塑料等光滑表面铺成一薄层,在薄层上进行层析。柱层析是将基质填装在管中形成柱形,在柱中进行层析。纸层析和薄层层析主要适用于小分子物质的快速检测分析和少量分离制备,通常为一次性使用,而柱层析是常用的层析形式,适用于样品的分析、分离纯化、制备等。蛋白质等生物大分子分离纯化中常用的凝胶层析、离子交换层析、亲和层析、高效液相色谱等都通常采用柱层析形式。
(3)根据分离原理的不同进行分类,层析主要可分为吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶层析、亲和层析等。
吸附层析是以吸附剂为固定相,根据固定相对待分离物质的吸附能力差异而使样品中各组分分离的方法。(www.xing528.com)
分配层析是利用样品中的不同组分在固定相和流动相之间的分配系数不同而达到分离目的的一种层析技术。
离子交换层析是以离子交换剂为固定相,利用离子交换剂上的活性基团对各组分离子的亲和力不同而达到分离效果的一种层析技术。
凝胶层析是以各种多孔凝胶为固定相,根据各组分的相对分子质量大小差异而达到分离目的的一种层析技术。
亲和层析是利用生物大分子与配体间专一的、可逆的亲和结合作用而使酶等生物大分子进行分离的一种层析技术。
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