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等密度-梯度离心:一种新型分离技术

时间:2023-06-16 理论教育 版权反馈
【摘要】:密度梯度离心可以分离沉降系数相差10%~20%S的颗粒,或者颗粒的密度差小于0.01 g/mL的组分。最常见的应用便是首先用差速离心分离不同大小的组分,然后将各组分进行等密度-梯度离心。图4-2等密度-梯度离心法的操作步骤图4-3联合使用差速离心和等密度-梯度离心分离法分离不同类型的细胞组分一般先用差速分离法将具有相同沉降系数的组分进行分离,接着用等密度-梯度离心将具有不同密度的组分进行进一步分离。

等密度-梯度离心:一种新型分离技术

一般差速分级离心只能分离沉降系数差别在10倍以上的颗粒,在10倍以下的颗粒就难以分开了。密度梯度离心可以分离沉降系数相差10%~20%S的颗粒,或者颗粒的密度差小于0.01 g/mL的组分。可以同时使混合样品中沉降系数相差在10%~20%S的几个组分分开,得到的产品纯度较高。

当不同固形物存在密度差时,在离心力作用下,固形物向下沉降或向上浮起,一直移动到与它们密度恰好相等的位置上并形成区带(如图4-2),此时密度差为零,离心力的值也即为零。当固形物继续向密度大的液相区域移动时,会受到指向转轴中心的力而上浮;相反,当固形物移动到密度较其本身密度小的液相区域时则会继续沉降。由此也可以看出,不管固形物的质量或体积是多少,只要密度相等便会处于同一区带上。两种离心方法各自利用了固形物特性中的大小或密度,如若将两种方法结合起来可以更高效地起到分离效果。最常见的应用便是首先用差速离心分离不同大小的组分,然后将各组分进行等密度-梯度离心(如图4-3)。

图4-2 等密度-梯度离心法的操作步骤(www.xing528.com)

图4-3 联合使用差速离心和等密度-梯度离心分离法分离不同类型的细胞组分

一般先用差速分离法将具有相同沉降系数的组分进行分离,接着用等密度-梯度离心将具有不同密度的组分进行进一步分离。

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