荧光测定仪器的主要构件及作用

测定荧光可以用荧光计和荧光分光光度计。前者结构较为简单且价格便宜，而后者构造精细，不仅定量测定的灵敏度和选择性高，而且也可做荧光物质的定性鉴定，应用广泛。二者的基本仪器构造是相似的。由光源发出的光，经单色器让特征波长的激发光通过，照射到液槽使荧光物质发射出荧光，经第二个单色器让待测物所产生的特征波长荧光通过，照射到检测器而产生光电流，经放大后以指针指示或利用记录仪记录其信号。仪器的主要构件如下。

1.光源

理想的激发光源能发出含有各种波长的紫外光和可见光，光的强度要足够大，而且在整个波段范围内强度一致。理想的光源不易得到，目前应用最多的光源是汞灯、溴钨灯，也有氙弧灯，氙弧灯所发出的光波强度大。

2.单色器

单色器是荧光仪的主要构件，它的作用主要是把入射光色散为各种不同波长的单色光，使用的单色器主要是棱镜和光栅。测定荧光的仪器有两个单色器，第一个放在光源和液槽之间，作用是滤去非特征波长的激发光；第二个放在液槽和检测器之间，作用是滤去反射光、散射光和杂荧光，让特征波长的荧光通过。荧光分光光度计采用石英棱镜或光栅作为单色器，分光能力强，从而提高了分析检测的灵敏度以及选择性。第二个单色器和检测器与光源呈90°分布，主要是为了防止透射光对荧光强度的干扰。

3.液槽(www.xing528.com)

液槽用来装溶液。由于普通的玻璃能够吸收323 nm以下的光，因此液槽一般用石英制成，而且四面均为透光面。

4.检测器

荧光分光光度计采用光电倍增管作为检测器，将其接收到的光信号转变为电信号，不同类型光电阴极的光电倍增管，能得到不同效应的荧光光谱。

荧光计和荧光分光光度计的操作方法与分光光度计有以下几点不同：①需要分别选择激发光波和荧光波长；②比色池的四个面均为透光面，比色池架一次只能放一个比色池，测定时，比色池的四个透光面均要擦干净；③为了防止长时间的光照对荧光强度造成影响，只需在读数时短时间打开光路。