研发抗登革热病毒和神经坏死病毒药物

1）登革热病毒

登革热病毒是一种在热带地区如我国广东、海南，以及新加坡、南美等地，通过蚊子叮咬传播的流行性疾病。每年有3亿～5亿人感染，死亡率为1％。我们知道，病毒感染没有特效药，主要靠自身免疫或者疫苗抵御。登革热病毒有四种病毒亚型，到目前为止，只开发出了一种用于感染过登革热病毒的病人的药物，因为其药物副作用很大，不能广泛应用于预防。

我们研究的目的是发展抗登革热病毒的药物。首先要了解这个病毒，登革热病毒的RNA约为11 kb，RNA进入人体细胞后，翻译成相对分子质量约370000的蛋白，处理成3个结构蛋白、7个非结构蛋白，最后组装成具有感染性的病毒。其中病毒会合成一种剪接酶，剪接酶的功能是将翻译的蛋白在特定的位点切成片段，如果剪接酶在NS3蛋白酶位点不能切断，病毒就不能繁殖，也就不会对人造成影响。我们在想，能不能有一种化学分子让剪接酶不工作。目前已有的研究大部分是攻击剪接酶的活性位点，占领底物的位点，让底物不能结合到位点上。但人体内也有结构和功能与病毒剪接酶相近的剪接酶，这种方法在阻击了病毒剪接酶的同时也阻击了人体自身剪接酶的功能，这种化学分子的毒性就很大。

我们研究发现，登革热病毒的NS3丝氨酸蛋白酶胰蛋白酶与人的胰蛋白酶的区别是多一个NS2B结构，对病毒胰蛋白酶的活性来说NS2B结构是必需的。通过核磁共振做结构和动力学分析，我们发现这种蛋白的结构与蜘蛛丝蛋白类似，存在关闭和开启两种状态，那这两种结构和它的生物功能之间有什么关系呢？我们将NS2B结构的M84和I86号氨基酸进行了点突变实验，发现点突变M84号氨基酸后，病毒的功能彻底消失，点突变I86号氨基酸后，病毒的功能明显降低。核磁共振解析变异体的结构，发现变异体的末端不再是β折叠，而是变成无序结构。因此，我们考虑能否引入化学小分子占领NS2B结构的M84号氨基酸，改变剪接酶的结构，使其失去功能。下一步，筛选出能占领NS2B结构M84号氨基酸的药物，通过数据库比对40000个化学分子，根据结构研究等一步步筛选出了57个，我们选取了11个化合物做实验，其中4个化合物有生物活性。再进行第二轮筛选，筛选出9个化合物，最好的化合物的亲和力是6μmol/L。下一步的研究计划是用化学方法合成特异性的小分子，使药物亲和力达到纳摩尔级的效果。(www.xing528.com)

2）NNV神经坏死病毒

我们研究的第二种病毒药物是针对神经坏死病毒的，这种病毒只影响水生生物，对海水鱼、淡水鱼影响很大，会造成鱼类的大面积死亡。目前有成熟的针剂疫苗，但在实际生产中操作麻烦，可行性不高。我们的目标是研究出口服或浸泡的神经坏死病毒疫苗。首先要了解病毒的结构，神经坏死病毒与登革热病毒的结构有类似性，表面蛋白组装成球状的类病毒蛋白。我们已经合成了口服的类病毒蛋白的疫苗，已经投入鱼类实验中。现在正在研究可浸泡的疫苗，使其能穿过鱼的皮肤或者腮。我们的思路是设计一些穿膜的多肽，再连接到类病毒蛋白表面，引起鱼的体内免疫反应。